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CSPP1中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1ELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:Inhibin Beta C /FITC 熒光標(biāo)記抑制βC抗體IgGD-木糖 超純級(jí), ≥99%Inhibin Alpha/Biotin 生物化抑制α抗體IgGβ-煙酰腺二核 95%Insulin/FITC 熒光標(biāo)記標(biāo)記胰島抗體IgG叔丁氧羰肼 98%Insulin/FITC 熒光標(biāo)記胰島抗體IgG肟 99%In
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | CSPP1中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1ELISA試劑盒 |
英文名稱 | CSPP1 ELISA Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號(hào) | LZ-E028597 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè), 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
5羥色(5-HT)試劑盒小豆蔻明硫代硫銨 99%7-吲哚 98%
5羥色(5-HT)試劑盒小蕓木素硫代硫銨 98%4-吲哚 98%
抑制素A(INH-A)試劑盒纈草3-酚 98%N-間苯 97%
抑制素A(INH-A)試劑盒纈草三酯3-酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品1-吡唑 98%
性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒性鉻藍(lán)K AR(S)-(+)-扁桃酯 98%
性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒辛弗林偶氮熒光桃紅 Biological stain(R)-(-)-扁桃酯 98%
脫氫表雄S7(DHEA-S7)試劑盒辛弗林鹽鹽偶氮熒光桃紅 Dye content 90 %2-烯 ≥99.5%
脫氫表雄S7(DHEA-S7)試劑盒辛辣內(nèi)酯A鹽氨脲 99%5-酰水楊酯 98%
脫氫表雄(DHEA)試劑盒辛夷脂素鹽氨脲 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.95%2- 98%
脫氫表雄(DHEA)試劑盒新補(bǔ)骨脂異黃1-氨-2-萘酚-4-磺 97%5-硝吲哚 98%
降鈣素因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒新茜素絡(luò)合指示劑 IndicatorDL-α-氨 98%
降鈣素因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒新二氫查爾茜素 97%R-(-)-1,2- 99%
(SS)試劑盒新內(nèi)酯苯藍(lán),溶 Biological stain(S)-(+)-1,2- 98%
(SS)試劑盒新對(duì)葉百部茜素綠 AR2-苯異丁 98%
生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP) 試劑盒新苦味素苯藍(lán)(溶) BS IND4-吡啶乙鹽鹽 98%
生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP) 試劑盒新魯斯可皂元偶氮胭脂紅G Biological stain4-(1-吡咯烷)苯 97%
CSPP1中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1ELISA試劑盒本探針是常用的細(xì)胞膜熒光探針之一,呈現(xiàn)橙紅色熒光。DiI是一種親脂性膜染料,進(jìn)入細(xì)胞膜后可以側(cè)向擴(kuò)散逐漸使整個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞膜被染色。DiI在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強(qiáng)的熒光。DiI被激發(fā)后可以發(fā)出橙紅色的熒光,DiI和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中,大激發(fā)波長(zhǎng)為549nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為565nm。
分子式:C59H97ClN2O4
分子量:933.88
CAS:41085-99-8。
DiI可以溶解于無(wú)水乙醇、DMSO和DMF,溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時(shí)可以適當(dāng)加熱,并用超聲處理以促進(jìn)溶解。
DiI被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長(zhǎng)期示蹤劑。DiI通常不會(huì)影響細(xì)胞的生存力。被DiI標(biāo)記的神經(jīng)細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下可以存活長(zhǎng)達(dá)4周,在體內(nèi)可以長(zhǎng)達(dá)一年。DiI在經(jīng)過(guò)固定的神經(jīng)元細(xì)胞膜上的遷移速率為0.2-0.6mm/day,在活的神經(jīng)元細(xì)胞膜上的的遷移速率為6mm/day。
DiI除了簡(jiǎn)單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外,還可以用于檢測(cè)細(xì)胞的融合和粘附,檢測(cè)發(fā)育或移植過(guò)程中細(xì)胞遷移,通過(guò)FRAP檢測(cè)脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測(cè)細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。
用于細(xì)胞膜熒光標(biāo)記時(shí),DiI的常用濃度為1-25μM,常用的濃度為5-10μM。DiI可以直接染色活的細(xì)胞或組織,染色時(shí)間通常為5-20分鐘。對(duì)于固定的細(xì)胞或組織,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚進(jìn)行固定,使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?huì)導(dǎo)致熒光背景較高。
注意事項(xiàng):熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
儲(chǔ)存條件:4℃避光,有效期一年。