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CEP350中心體蛋白350kDaELISA試劑盒的熱銷產(chǎn)品:Integrin Alpha3/FITC 熒光標(biāo)記整合α3抗體IgG硅烷 >98.0%(GC)Integrin Alpha3 Beta1/FITC 熒光標(biāo)記整合α3β1抗體IgG鄰 AR,98%Integrin a7/FITC 熒光標(biāo)記整合α7抗體IgG間 CPIntegrin AlphaE2/CD3 /FITC 熒光標(biāo)記
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
服務(wù):
公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
CEP350中心體蛋白350kDaELISA試劑盒 | CEP350 ELISA Kit | 48T/96T | LZ-E028598 |
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
抑制素B(INH-B)試劑盒新綠原茜素綠 Dye content 95%(R)-1-Boc-3-羥吡咯烷 98%
抑制素B(INH-B)試劑盒新芒果燦爛綠 高純級,95%2-(1-哌啶)苯 97%
促狀腺素釋放激素(TRH)試劑盒新藤黃鉍試劑Ⅰ 97%喹唑啉 98%
促狀腺素釋放激素(TRH)試劑盒新西蘭牡荊鉍試劑II CP三氟磺鈧 98%
雌激素(E)試劑盒新知母皂BII鉍試劑II 98%四氫-2 2-二-4H-吡喃-4- 95%
雌激素(E)試劑盒考馬斯亮藍(lán)G250 AR三(4-溴苯) 98%
褪黑素(MT)試劑盒熊果考馬斯亮藍(lán)G250 AR,無蛋白2-酰噻唑 97%
褪黑素(MT)試劑盒熊果考馬斯亮藍(lán)G250 70%,用于電泳500ml透氣不透液墊片 40mm口徑 配套42mm口徑蓋
6前列腺素(6-K-PG)試劑盒熊果乙酯考馬斯亮藍(lán)R250 AR1,3-二 99%
6前列腺素(6-K-PG)試劑盒熊去氧膽考馬斯亮藍(lán)R250 電泳級,≥90 %(HPLC)3-苯吡啶 97%
血栓素B2(TXB2)試劑盒繡球酚鈹試劑II AR2-苯吡啶 98%
血栓素B2(TXB2)試劑盒續(xù)隨二萜鉭試劑 AR,98.0%碳鋇 AR,99%
皮質(zhì)/上腺(CORT)試劑盒旋復(fù)花內(nèi)酯鹽副品紅 Dye content >85 %碳鍶 AR,99%
皮質(zhì)/上腺(CORT)試劑盒鹽副品紅 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-環(huán)戊 97%
前列腺素E2(PGE2)試劑盒乙鹽副品紅(0.2%鹽副玫瑰 0.2% 1mol/L,0.2%鹽副玫瑰苯溶液碳鋇 AR,99%
前列腺素E2(PGE2)試劑盒雪松鹽副品紅 Biological stain碳鋇 CP,98%
CEP350中心體蛋白350kDaELISA試劑盒本探針是常用的細(xì)胞膜熒光探針之一,呈現(xiàn)綠色熒光。DiO是一種親脂性膜染料,進(jìn)入細(xì)胞膜后可以側(cè)向擴(kuò)散逐漸使整個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞膜被染色。DiO在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強(qiáng)的熒光。DiO被激發(fā)后可以發(fā)出綠色的熒光,DiO和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中,大激發(fā)波長為484nm,大發(fā)射波長為501nm。
CAS:34215-57-1
分子式:C53H85ClN2O6
分子量:881.72
DiO可以溶解于無水乙醇、DMSO和DMF,溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時(shí)可以適當(dāng)加熱,并用超聲處理以促進(jìn)溶解。
DiO被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。DiO通常不會(huì)明顯影響細(xì)胞的生存力(viability)。DiO對于細(xì)胞膜染色的熒光強(qiáng)度通常要低于DiI,有時(shí)對于某些經(jīng)過固定的組織的染色效果欠佳。
DiO除了簡單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外,還可以用于檢測細(xì)胞的融合和粘附,檢測發(fā)育或移植過程中細(xì)胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。
用于細(xì)胞膜熒光標(biāo)記時(shí),DiO的常用濃度為1-30μM,常用的濃度為5-10μM。DiO可以直接染色活的細(xì)胞或組織,染色時(shí)間通常為5-20分鐘。對于固定的細(xì)胞或組織,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚進(jìn)行固定,使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?huì)導(dǎo)致熒光背景較高。
注意事項(xiàng):熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
儲(chǔ)存條件:4℃避光,有效期一年。