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產(chǎn)品中心

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馬疥螨PCR檢測試劑盒規(guī)格

產(chǎn)品簡介

馬疥螨PCR檢測試劑盒規(guī)格
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
VZV-IgG檢測試劑盒將推薦的洗滌緩沖液至少0.4 mL注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次

更新時間:2021-03-13
訪問次數(shù):444
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注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

 產(chǎn)品名稱

 馬疥螨PCR檢測試劑盒規(guī)格

 英文名稱

 Sarcoptes scabiei var(equi)PCR

 貨號

 LZP7276

組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
Hosenkoside A1-丁基-3-甲基咪唑磷酸二丁酯鹽 96%溴 CP,98.5%

Hosenkoside B2-溴-3-硝基吡啶 98%溴 ≥99.5%

Hosenkoside C1-丁基-3-甲基咪唑雙胺鹽 97%鄰苯二甲酸二癸酯 90%

Hosenkoside F1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽 95%環(huán)氧乙烷 99.5%

Hosenkoside G1-丁基-3-甲基咪唑辛硫酸鹽 99%1,8-辛二 98%

Hosenkoside K1-丁基-3-甲基咪唑硫酸鹽 95%三乙四胺四鹽酸鹽 97%

Hosenkoside M5-溴異喹啉 98%環(huán)戊酮 GCS,≥99.5% (GC)

Huzhangoside D5-溴-7-氮雜吲哚 98%環(huán)戊酮 99.5%

Hyptadienic acidN-(叔丁氧羰基)-1,4-丁二胺 97%環(huán)戊酮 CP

ItodiolN-丁基溴化吡啶 99%環(huán)戊酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品

Inulalide A1-丁基-3-甲基咪唑溴鹽 97%2,6-二甲氧基苯酸 98%

Isomangiferolic acid1-丁基-3-甲基咪唑四氟酸鹽 97%4-叔丁基苯甲酸 99%

Iso-mogroside V1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽 97%對叔丁基苯甲酸甲酯 99%

Jacoumaric acid1-丁基-3-甲基咪唑氯鹽 97%對叔丁苯  95%

Jangomolide1-丁基-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽 97%蘇丹藍(lán)II 高純級,97%

Japonicones D1-丁基-4-甲基吡啶六氟磷酸鹽 99%蘇丹藍(lán)II Biological stain

沒食子酸甲酯(>98%,BC)ERG (A7L1G) Rabbit mAb (PE Conjugate)phospho-P53(Ser33)  磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

肌激酶(比活性:>200 U/mg,BC)TKS5 Antibodyphospho-P53(Ser315)  磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

磷酸酮酸-環(huán)己胺鹽(>98%,BC)TRPC6 (D3G1Q) Rabbit mAbphospho-P53(Ser20)  磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

磷酸二酯酶 IIPhospho-CaMKK2 (Ser495) Antibodyphospho-P53(Ser15)  磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

丁二酰亞胺(>98%,BR)Orexin (D6G9T) Rabbit mAbPhospho-p40phox (Thr154)  磷酸化嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4抗體

4-聯(lián)苯單乙酸CaMKK2 (D8D4D) Rabbit mAbphospho-p38 MAPK/MAPK14(Thr180/Tyr182)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗體

5-溴尿苷(>99%,BR)eIF4E (C46H6) Rabbit mAb (Biotinylated)phospho-p23 (Ser113)  磷酸化端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體

ADA緩沖液二鈉鹽(>99%,BR)SIX1 (D5S2S) Rabbit mAbphospho-p107/RBL1(Ser975)  磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體

無蛋白酶牛血清白蛋白CAR (D3W3G) Rabbit mAbphospho-p107(Thr369)   磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體

六氯化鋁CD8α (2.43) Rat mAb (violetFluor™ 450 Conjugate)phospho-ODF2(Ser796)  磷酸化尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體
馬疥螨PCR檢測試劑盒規(guī)格小鼠多巴(DA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8°C1克

小鼠多巴D1受體(D1R)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠兒茶(CA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

小鼠二氧化酶(DAO)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光25克

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5克

小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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