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鮭腎桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:Apo C3檢測(cè)試劑盒i 超聲破碎:取適量PBS 重懸細(xì)胞,用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂。
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 鮭腎桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 |
英文名稱(chēng) | Renibacterium salmoninarumPCR |
貨號(hào) | LZP7221 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
Beryllon I茚三酮,合 AR,95.0%硫酸 CP,98.5%
Beryllon II茚三酮,合 ACS reagent, ≥98.0% (UV)鹽酸苯甲脒,合 98%
Graphite powder5-硝基 98%4-氯苯甲 99.0%
Permutit4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑 99%4-苯甲 97%
Soda lime4-硝基-7-哌苯并氧雜惡二唑 98%1-氨基茚滿 98%
Sea sand4-肼基-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑 98%楊 98%
Lipofectamine 2000 Transfection Reagent1,4-哌二乙磺酸 99%1-氨基茚滿 98%
Cinchonine哌-N,N-雙(2-羥基烷磺酸) 99%鹽酸阿霉素 98%
Rhodanine苯甲≥98.5% (GC)(R)-(+)-2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘 98%
Diethyl oxalate對(duì)二甲苯二聚體 99%(S)-(-)-2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘 98%
Iodine對(duì)磷酸二鈉 98%(±)-2,2'-雙-(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘 98%
Chinese red5’-磷酸吡哆,一 98%(R)-(-)-1,1'-聯(lián)-2-萘酚二(三氟甲磺酸酯) 98%
Bentonite鹽酸吡哆 99%1,1'-聯(lián)萘酚-2,2'-雙(三氟磺酸酯) 98%
Boron carbide1,4-哌二乙磺酸二鈉鹽 BC二苯基膦 95%
Boron oxide1,4-哌二乙磺酸倍半鈉鹽 99%(R)-(-)-5,5'-雙[二(3,5-二叔丁基-4-甲氧基苯基)磷]-4,4'-二-1,3
Glass Fiber并五苯 98%(S)-DTBM-SEGPHOS 98%
染料木素/金雀異黃酮ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAbPPM1B 蛋白質(zhì)磷酸酶1B抗體(PP2Cβ)
染料木素/金雀異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Cleaved Caspase-8 (Asp387) (D5B2) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (PE Conjugate)PPIL1 親環(huán)素相關(guān)蛋白1抗體
酚YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAbPPIG 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體
酚(標(biāo)準(zhǔn)品)YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAbPPIB/Cyclophilin B 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIB抗體
木犀草素SYAP1/BSTA AntibodyPPIA/Cyclophilin A 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIA抗體
木犀草素(標(biāo)準(zhǔn)品)LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)PPHLN1 脈周蛋白1抗體(胃癌抗原蛋白Ga50)
熊果酸SimpleChIP® Human RNU2-1 Promoter PrimersPPARGC1A/PGC1 α 過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體
熊果酸;烏蘇酸(標(biāo)準(zhǔn)品)PHB2 (E1Z5A) Rabbit mAbPPAR-delta/beta D型-過(guò)氧化酶活化增生受體抗體
香葉木素CdGAP (D6J9G) Rabbit mAbPPAR Gamma 過(guò)氧化酶活化增生受體γ抗體
香葉木素(標(biāo)準(zhǔn)品)APC11 (D1E7Q) Rabbit mAbPPAR gamma 過(guò)氧化酶活化增生受體γ抗體
鮭腎桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格人腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:250克
人腫瘤特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:30毫升
人腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT1克
人腫瘤相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃,避光250毫克
人腫瘤血管生長(zhǎng)因子(TAF)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃1克
人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT100毫克
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。