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匙狀*毛樣線蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:IDO檢測試劑盒染色后宜盡快檢測,時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
產(chǎn)品分類
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注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 匙狀*毛樣線蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
英文名稱 | Nematodirus spathigerPCR |
貨號(hào) | LZP7057 |
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
L-Ornithine L-aspartate salt大鼠心肌成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基質(zhì)苯胺標(biāo)樣 濃度范圍:0.9,2.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品
D-Cysteine大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基苯胺 MDI級,≥99.98%(GC)
D-Cysteine hydrochloride mohydrate大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基苯乙烯 Standard for GC,>99.5%(GC)
L-Lysine acetate salt大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基苯乙烯 CP,含10-15ppm 4-叔-丁基鄰苯二酚穩(wěn)定劑
D-Phenylglycine大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基苯乙烯 99%,含10-15ppm 4-叔-丁基鄰苯二酚穩(wěn)定劑
DL-rvaline大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基苯乙烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
L-2-Amibutyric acid大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:二硫化碳
D-2-Amibutyric acid大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液0.88mg/ml,溶劑:甲
DL-2-Amibutyric acid大鼠骨細(xì)胞*培養(yǎng)基苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml
L-Homophenylalanine大鼠滑膜細(xì)胞*培養(yǎng)基甲基叔丁基 色譜級,≥99.9% (GC)
D-Homophenylalanine大鼠骨骼肌細(xì)胞*培養(yǎng)基乙基苯 >99.5%(GC)
DL-Homophenylalanine大鼠表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基2-丁酮 ACS, ≥99.0%
L-Homophenylalanine ethyl ester hydrochloride大鼠成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基1,2,4-*苯 98%
BOC-L-Homophenylalanine大鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基2,5-二氯 99%
BOC-D-Homophenylalanine大鼠破骨細(xì)胞*培養(yǎng)基降冰片烯二酸酐 99%
Sodium Glycinate大鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基降冰片烯二酸酐 95%
鹽酸吉西他濱Erdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽Synaptotagmin 1/SYT1 突觸結(jié)合蛋白1抗體
鹽酸吉西他濱(標(biāo)準(zhǔn)品)Tie1/JTK14 peptide 上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1抗原Synaptopodin 突觸極蛋白synaptopodin抗體
甲磺酸吉米沙星Tie2(Porcine tyrosine kinase with immuglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2抗原Synapsin II 神經(jīng)突觸素2抗體
甲磺酸吉米沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Rarres2/TIG2/Chemerin(Retiic acid receptor responder protein 2) 視黃酸受體應(yīng)答蛋白2抗原SYN1 神經(jīng)突觸素1抗體
膽酸鈉TLR3 (Toll-like receptor 3) Toll樣受體3抗原SYK 非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體
醋酸胰高血糖素TLR4/CD284 (Toll-like receptor 4) Toll樣受體4抗原SVH/ARMC10 肝癌蛋白剪接變異體蛋白抗體
醋酸戈那瑞林TLR5/CD285 (Toll-like receptor 5) Toll樣受體5抗原sVEGFR2 可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體
鹽酸格拉司瓊TM(Thrombomodulin) 血栓調(diào)節(jié)蛋白多肽SV2A 突觸泡蛋白2A抗體
鹽酸格拉司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)Tn-C(Tenascin-C)C-Terminus 腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原SUZ12/CHET9 胚胎干細(xì)胞抑制蛋白Suz12抗體
氫氯噻TNF-alpha 腫瘤壞死因子-α抗原Survivin 細(xì)胞凋亡抑制因子抗體
匙狀*毛樣線蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃5克
人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
人膽固醇(CH)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1米
人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT25克
人膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
人膽堿乙?;?/font>(CHAc)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
人膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:10克