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新孢子蟲通用PCR檢測試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關產品:Syk檢測試劑盒在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等
產品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 新孢子蟲通用PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Neospora spp.PCR |
貨號 | LZP7061 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
D-Lysine小鼠肺大靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基2,4,6-*酸 99%
L-Prolinamide小鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基N-[(*基硅)甲基]芐胺 98%
D-Prolinamide小鼠胰島細胞*培養(yǎng)基10-脫乙酰基巴卡丁 III 分析標準品,≥95%
Boc-L-Phenylalanil小鼠胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基10-脫乙酰基巴卡丁 III 95%
Boc-L-alanil小鼠胰腺導管上皮細胞*培養(yǎng)基吳茱萸內酯 分析標準品,>98%(HPLC)
BOC-L-Prolil小鼠頜下腺上皮細胞*培養(yǎng)基漆黃素 分析標準品,≥98%
L-allo-Threonine小鼠腮腺細胞*培養(yǎng)基漆黃素 98%
Sarcosine ethyl ester HC1小鼠上皮細胞*培養(yǎng)基5-羥基色氨酸 99%
Sarcosine methyl ester HC1小鼠胰腺上皮細胞*培養(yǎng)基鹽酸育亨賓 99%
α-Methyl-L-DOPA小鼠甲狀腺上皮細胞*培養(yǎng)基鹽酸育亨賓 分析標準品,≥99%
N-Acetyl-L-Leucine小鼠淋巴管內皮細胞*培養(yǎng)基過氧化二叔丁基 97%
N-Acetyl-L-Glutamic acid小鼠淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基苯甲酰氯 AR,99.0%
N-Acetyl-L-tyrosine小鼠外周血白細胞*培養(yǎng)基過氧化苯甲酰 75%, remainder water
N-Acetyl-L-phenylalanine小鼠骨髓基質細胞*培養(yǎng)基過氧化氫叔丁 70% in H2O
Melatonin小鼠食管上皮細胞*培養(yǎng)基過氧化苯甲酸叔丁酯 98%
L-Leucil小鼠食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基1,1-雙(叔丁基過氧基)環(huán)己烷 80 wt. %
來曲唑VASH1(Vasohibin 1) 兔抗血管抑制蛋白1抗原STIP1 應激誘導磷蛋白1抗體
來曲唑(標準品)VCAM-1/CD106(Vascular cell adhesion molecule 1 isoform b precusor; CD106 antigen) 血管內皮細胞粘附分子抗原STIM1 基質交感分子1抗體
醋酸亮瑞林VCAM-1/CD106 (Vascuolar cell adhesion molecule 1) 血管內皮細胞粘附分子抗原STIL 中斷位點蛋白STIL抗體
左乙拉西坦VDAC peptide 電壓依賴性陰離子通道抗原STEAP4/TNFAIP9 腫瘤壞死因子α誘導蛋白9/前列腺六跨膜上皮抗原4抗體
左乙拉西坦(標準品)VEGF 血管內皮生長因子(多肽抗原)STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗體
鹽酸林可霉素VEGF-A(Vascuoar endothelial growth factor A) 血管內皮生長因子A抗原Staufen/STAU1 雙鏈RNA結合蛋白Staufen抗體
鹽酸林可霉素(標準品)VEGF-C(Vascuoar endothelial growth factor-C) 血管內皮生長因子C型抗原STAU2 雙鏈RNA結合蛋白Staufen2抗體
三代甲狀腺素鈉鹽VEGFR2 血管內皮生長因子受體2STAT6 信號轉導和轉錄激活因子6抗體
鹽酸洛美沙星sVEGFR2 可溶性血管內皮生長因子受體2STAT5b 信號轉導和轉錄激活因子5b抗體
鹽酸洛美沙星(標準品)VEGFR-3/FLt-4 血管內皮細胞生長因子受體-3(多肽)STAT5 信號轉導和轉錄激活因子5抗體
新孢子蟲通用PCR檢測試劑盒價格人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1克
人低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:10克
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人低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃10KU
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人低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克