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MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:DAPI溶液(5mg/ml)DAPI染色液Hoechst 33258細(xì)胞藍(lán)色熒光染料Hoechst 33258染色液Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料Hoechst 33342染色液活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)細(xì)胞活力檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)碘化丙啶Annexin V-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
產(chǎn)品分類
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中文名稱:MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒
英文名稱:MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:500次
產(chǎn)品貨號:LZ-01X6321
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
MTS是一種新型甲臜化合物,和MTT同屬四唑氮衍生物。MTS能被活細(xì)胞里的線粒體脫氫酶降解而產(chǎn)生棕黃色水溶性的甲臜,通過測定甲臜的光譜吸收,進(jìn)而可以測定細(xì)胞的增殖情況。 產(chǎn)品特點: 1.本試劑盒是單溶液式細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑,主要成分包含MTS和一個電子耦合試劑,溶液的穩(wěn)定性強(qiáng),反應(yīng)的靈敏度高。 2.操作簡便、快捷??芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。 3.無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。 4.與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。 5.操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。 儲存條件:低溫運輸,-20℃避光保存,有效期半年。 使用效果: 96孔板中加入細(xì)胞100μL/孔(約1×104),37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時,加入適當(dāng)濃度的受試化合物。培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,每孔中加入10μL的MTS細(xì)胞增殖及毒性檢測溶液。37℃孵育1-4小時。490nm波長檢測光密度。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞受體(BCR)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B因子(BF)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(紅色熒光)
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(顯色法)
Caspase 1 活性檢測試劑盒
Caspase 2 活性檢測試劑盒
Caspase 3 活性檢測試劑盒
Caspase 4 活性檢測試劑盒
Caspase 6 活性檢測試劑盒
Caspase 8 活性檢測試劑盒
Caspase 9 活性檢測試劑盒
Caspase抑制劑(Z-VAD-FMK)
Caspase 3抑制劑(Ac-DEVD-CHO)
線粒體膜電位檢測試劑盒
羅丹明123
CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒
細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)
Ad-GFP-LC3B
Ad-mCherry-GFP-LC3B
DAPI溶液(5mg/ml)
DAPI染色液
Hoechst 33258細(xì)胞藍(lán)色熒光染料
MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測試劑盒Hoechst 33258染色液
Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料
Hoechst 33342染色液
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。