Product Center
DEFA3中性粒細(xì)胞防御素3ELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:IL-28A/IFNL2/FITC 熒光標(biāo)記白介28A抗體IgG化 CP,98.5%IL-28B/IL-28C/FITC 熒光標(biāo)記白介28B抗體IgG化 GR,99.8%IL-29/IFNL1/FITC 熒光標(biāo)記白介29抗體IgG化 PTIL-31/FITC 熒光標(biāo)記白介31抗體IgG化 SPIL-31RA/CRL3/
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | DEFA3中性粒細(xì)胞防御素3ELISA試劑盒 |
英文名稱 | DEFA3 ELISA Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號 | LZ-E028595 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)試劑盒細(xì)葉遠(yuǎn)志皂無水碳鈉 AR4-(5-乙-1,2,4-噁二唑-3-)苯 97%
糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)試劑盒夏佛塔丁二鈉 AR,99.0%硫代乙乙酯 98%
糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)試劑盒仙鶴草酚B亞硝鐵化鈉 99.98% metals basis3-氟-4-酚 99%
糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)試劑盒仙鶴草酚D亞磷三苯酯 CP,97%對氟苯乙酯 99%
高敏三狀腺原氨(u-T3)試劑盒仙茅亞磷三苯酯 98%3-氟芐 97%
高敏三狀腺原氨(u-T3)試劑盒纖精四氫糠 AR,98.0%8-氟-4-羥-2-三氟喹啉 97%
黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒纖細(xì)四氫糠 CP對氟苯酯 97%
黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒薟精四氫糠 99%6-羥-2-吡啶羧 97%
8異前列腺素(8-iso-PG)試劑盒腺四 ARN-(2-羥乙)哌 98%
8異前列腺素(8-iso-PG)試劑盒腺嘌呤苯二異酯 98%(劇品)2-羥苯 97%
素(Renin)試劑盒 相思豆素苯二異酯 Standard for GC(劇品)2-羥 99%
素(Renin)試劑盒 相思子苯硫酚 99%(劇品)2- 95%
上腺素(EPI)試劑盒香草四 離子對色譜級,≥99.0% (AT)(R)-(-)-5-羥-2-吡咯烷 99%
上腺素(EPI)試劑盒香草四 ACS, ≥98.0%(S)-(+)-5-羥-2-吡咯烷 98%
雌二受體(ER)試劑盒香草乙乙烷 99%,含銅屑穩(wěn)定劑(S)-1-Boc-3-羥吡咯烷 98%
雌二受體(ER)試劑盒三 AR,99.5%2-羥-4-三氟嘧啶 97%
DEFA3中性粒細(xì)胞防御素3ELISA試劑盒本試劑盒是一種基于衰老時SA-β-Gal(senescence-associated β-galactosidase)活性水平上調(diào)而對衰老細(xì)胞或組織進(jìn)行染色檢測的試劑盒。在普通的光學(xué)顯微鏡下就可以觀測到細(xì)胞或組織的衰老情況。本試劑盒可以用于培養(yǎng)細(xì)胞的衰老檢測,也可以用于組織切片的衰老檢測。
試劑盒組份:
β-半乳糖酶染色固定液—————100ml
X-Gal溶液————————————5ml
β-半乳糖酶染色液A——————1ml
β-半乳糖酶染色液B——————1ml
β-半乳糖酶染色液C——————100ml
絕大多數(shù)正常細(xì)胞被認(rèn)為僅有有限的分裂能力,在不能分裂后就進(jìn)入衰老(senescence)狀態(tài)。此時細(xì)胞仍然是存活的,但細(xì)胞的基因和蛋白的表達(dá)譜發(fā)生了很大改變。衰老(senescence)的細(xì)胞不能在一些常規(guī)的刺激下再誘導(dǎo)細(xì)胞分裂,并且衰老細(xì)胞的細(xì)胞周期分布也比較特殊,不同于一些損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞休眠,也不同于細(xì)胞生長接觸抑制的情況。衰老細(xì)胞細(xì)胞通常體積變大,表達(dá)pH 6.0時有高酶活性的β-半乳糖酶。細(xì)胞衰老也被認(rèn)為是生物體抑制腫瘤的一種方式,同時也是生物體老化(aging)的一種潛在原因。
本細(xì)胞衰老β-半乳糖酶染色試劑盒,以X-Gal為底物,在衰老特異性的β-半乳糖酶催化下會生成深藍(lán)色產(chǎn)物。從而在光學(xué)顯微鏡下很容易觀察到變成藍(lán)色的表達(dá)β-半乳糖酶的細(xì)胞或組織。