Product Center
HbH血紅蛋白HELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:TRAF1 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗原規(guī)格: 0.5mg*TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗原規(guī)格: 0.5ml*TRAF3/CD40bp (CD40 binding protein) 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗原規(guī)格: 0.5m
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | HbH血紅蛋白HELISA試劑盒 |
英文名稱 | HbH ELISA Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號 | LZ-E028844 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)試劑盒PAGE連續(xù)凝膠電泳緩沖液(2×,pH8.9)硝烷 光譜級, ≥99%鉍 99.99%
大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒 PAGE連續(xù)蛋白上樣緩沖液(5×)硝烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5% (GC)金屬鎵 99.999% metals basis
大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒 Tricine加樣緩沖液(2×) 80%,750 μg/mg氧化鎵 99.999% metals basis
大鼠雙氫睪(DHT)試劑盒乙凝膠緩沖液(4×) 效價(jià) >60 Units/mg銦 99.9999%
大鼠雙氫睪(DHT)試劑盒Tris凝膠緩沖液(4×,pH7.1-8.9)鋅 from Bacillus licheniformis, ~70,000 U/g氧化銦 99.99% metals basis, <100 nm (TEM)
大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)試劑盒Tris-甘油加樣緩沖液(2×)溴烯, 包含≤1000 ppm 氧化烯穩(wěn)定劑, 98%氧化銦 99.99% metals basis, <50 nm (TEM)
大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)試劑盒Tris-甘油加樣緩沖液(5×)2-溴-3-丁 98%氫氧化銦 99.99% metals basis
大鼠抗抗體(AsAb)試劑盒Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH6.8)溴苯 Standard for GC,>99.5%(GC) 納米二氧化錫 99.99% metals basis,50-70nm
大鼠抗抗體(AsAb)試劑盒Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH6.8)溴乙芐酯 96%硒粉 99.9% metals basis,200目
大鼠狀旁腺激素(PTH) 試劑盒 Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH6.8)溴乙烷 99%碲粉 粉末,99.99% metals basis,100目
大鼠狀旁腺激素(PTH) 試劑盒 Tris-HCl緩沖液(1.5mol/L,pH8.8)1-溴戊烷 CP,98%高純錫 99.999% metals basis,1-6mm,顆粒
大鼠組(HIS)試劑盒Tris-HCl緩沖液(1.5mol/L,pH8.8)1-溴戊烷 GR,99%鋅 99.999% metals basis
大鼠組(HIS)試劑盒Tris-HCl緩沖液(1.5mol/L,pH8.8)溴代十四烷 98%硫 1.5-2.0 units/mg
大鼠白介素13(IL-13)試劑盒Tris-Tricine陽緩沖液(5×,pH8.9)溴代十四烷 CP,97%聚乙烯縮丁 航空級
大鼠白介素13(IL-13)試劑盒Tris-Tricine陰緩沖液(5×)1-溴代正己烷 99%藥用塑料袋 630*900*0.09mm,用于乘裝5-25kg固體
大鼠白介素15(IL-15)試劑盒Tris-甘氨電泳粉劑(1×)溴代正丁烷 AR,99%4-溴聯(lián)苯 98%
HbH血紅蛋白HELISA試劑盒用途:
腺三磷酶染色,用于骨骼肌中區(qū)分兩種肌纖維
注意事項(xiàng):
主要由堿性前孵育液、性前孵育液、孵育液、硫化液等組成。用堿性前孵育液處理Ⅰ型肌(紅肌、慢纖維)淡染,Ⅱ型肌(白肌、快纖維)深染;用性前孵育液處理Ⅰ型肌(紅肌、慢纖維)深染,Ⅱ型肌(白肌、快纖維)淡染。
儲存條件:4℃,避光,6個月
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。