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空腸彎曲菌(CJ)核酸試劑盒規(guī)格

產品簡介

空腸彎曲菌(CJ)核酸試劑盒規(guī)格
上海聯(lián)祖生物相關產品:
結構域樣蛋白1抗體Quercetin 3-O-robibioside中文名:槲皮素-3-O-刺槐二糖苷別名:槲皮素-3-O-洋槐糖苷分子式:C27H30O16

染色體相關蛋白CAP抗體Bavachin中文名:補骨脂二氫黃酮別名:4',7-Dihydroxy-6-prenylflavane分子式:C20H20O4

骨/軟骨蛋白多糖1抗

更新時間:2021-03-13
訪問次數:835
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 空腸彎曲菌(CJ)核酸試劑盒規(guī)格

 規(guī)格

 48T

 貨號

 LZP8088

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
吉馬酮(標準品)Phospho-SHP-2 (Tyr580) (D66F10) Rabbit mAb2-羥基-6-萘甲酸

加蘭他敏(標準品)Phospho-SHP-2 (Tyr580) (D66F10) Rabbit mAb2-硝基-甲砜

甲基蓮心(標準品)IP6K3 (D9O7J) Rabbit mAb硫氫化鈉

5-O-甲基維斯阿米苷(標準品)RACK1 (D59D5) Rabbit mAb異基肼鹽酸鹽

N-甲基野靛(標準品)Galectin-9 (D9R4A) XP® Rabbit mAb5-硝基吲哚-2-羧酸酯

9-甲氧基喜樹(標準品)Galectin-9 (D9R4A) XP® Rabbit mAb氧基酮

10-姜酚(標準品)FastScan™ Phospho-Akt1 (Ser473) ELISA Kit酸

6-姜酚(標準品)RF2IP (D9H4) Rabbit mAb基三基化膦

8-姜酚(標準品)Jagged1 (D4Y1R) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)環(huán)戊基異酸酯

姜酮(標準品)EGF Receptor (D1D4J) XP® Rabbit mAb (Neutralizing)(S)-羥基哌啶鹽酸鹽

姜酮(標準品)EGF Receptor (D1D4J) XP® Rabbit mAb (Neutralizing)(S)-1-N-叔丁氧羰基-2-(氨基基)哌啶

6-姜酚(標準品)FoxM1 (D12D5) XP® Rabbit mAb2-酰酸甲酯

絞股藍皂苷XLIX(標準品)FoxM1 (D12D5) XP® Rabbit mAbN-甲基-1,2-二

YM-201636MMP-1 (E9S9N) Rabbit mAb2,2-二羥甲基酸

金石蠶苷(標準品)ERCC1 (D61F5) Rabbit mAb1-萘甲

金絲桃苷(標準品)Phospho-Histone H2A.X (Ser139/Tyr142) Antibody2-

京尼平(標準品)SKAR α/β (D65E8) XP® Rabbit mAb五甘

阿非迪霉素;艾菲地可寧LRP5 (D5G4) Rabbit mAb1,8-二氨基萘

胞質脫氫酶1CD117/FITC  熒光素標記CD117IgG100 ul

ADP核糖基化樣因子ARL3CD133 gen/FITC  熒光素標記造血干細胞抗原CD133IgG100 ug

花生四酸15脂氧合酶1OX40/CD134/TNFRSF4/FITC  熒光素標記CD134IgG100 ul

癌增強蛋白2IL-7Ra/CD127/PE   熒光素PE標記兔抗、大、、馬、兔白細胞介素-7受體aIgG100 ul

α1微球蛋白CD137/TNFRSF9/FITC  熒光素標記CD137IgG100 ul

α晶狀體球蛋白B/αB-crystallinCD133 antigen/PE  熒光素藻紅蛋白標記兔抗、大、和果蠅CD133IgG100 ul

腺苷A2b受體/神經生長因子1受體HVEM/TNFRSF14/FITC  熒光素標記腫瘤壞死因子受體超家族成員14IgG100 ul

AMPK的相關蛋白激酶5Syndecan-1/CD138/FITC  熒光素標記多配體聚糖IgG100 ul

致瘤蛋白32相關蛋白1CD141/FITC  熒光素標記凝血調節(jié)蛋白IgG100 ul
空腸彎曲菌(CJ)核酸試劑盒規(guī)格BarX1蛋白抗體Leucoside中文名:別名:Kaempferol 3-O-sambubioside分子式:C26H28O15

Bcl-2同源結構域樣蛋白1抗體Quercetin 3-O-robibioside中文名:槲皮素-3-O-刺槐二糖苷別名:槲皮素-3-O-洋槐糖苷分子式:C27H30O16

染色體相關蛋白CAP抗體Bavachin中文名:補骨脂二氫黃酮別名:4',7-Dihydroxy-6-prenylflavane分子式:C20H20O4

/軟骨蛋白多糖1抗體Kaempferol 5,7,4'-trimethyl ether中文名:酚-5,7,4'-*醚別名:3-Hydroxy-5,7,4'-trimethoxyflavone分子式:C18H16O6

嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體biletin中文名:川陳皮素別名: 3',4',5,6,7,8-Hexamethoxyflavone分子式:C21H22O8

 

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