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嗜水氣單胞菌(AH)核酸試劑盒規(guī)格

產(chǎn)品簡介

嗜水氣單胞菌(AH)核酸試劑盒規(guī)格
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
苷-5單酸(進(jìn)口原裝) β-Actin (13E5) Rabbit mAb2,4,6-三肼

唾液酸糖蛋白受體1BMP4/FITC 熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋白4IgG1 Kit

芳香基硫酸酯酶FBMP6/FITC 熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋白6IgG100 ul

A激酶錨定蛋白5BMP-7/FITC 熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋

更新時(shí)間:2021-03-13
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注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

 產(chǎn)品名稱

 嗜水氣單胞菌(AH)核酸試劑盒規(guī)格

 規(guī)格

 48T

 貨號

 LZP8052

組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
?
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
O-β-D-葡萄糖( 1→3)- a -L-鼠李糖(1→2)- a-L-阿拉伯糖 齊墩果酸– 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷Phospho-KSR1 (Ser392) Antibody1-(2-基)哌啶

O-b-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 2羥基羽扇豆20(29)--28–酸- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷PP2A B Subunit AntibodyN-(2-氨基基)嗎啉

O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 常春藤配基- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷PP2A B Subunit Antibody2-溴聯(lián)

D-果糖-6-酸二鈉鹽RelB Antibody基酰亞鹽酸鹽

5-溴吡啶-甲Phospho-Tau (Thr205) (E7D3E) Rabbit mAb溴-alpha-

6-溴吡啶-2-甲SLP-76 Antibody5-羥基異喹啉

白頭翁皂苷BSLP-76 Antibody1,二氧雜環(huán)己烷-2-酮

O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 2羥基羽扇豆20(29)--28–酸;白頭翁皂苷DAID (EK2 5G9) Rat mAb2,二甲氧基

羅漢果皂苷IvaDigoxigenin (D8Q9J) Rabbit mAb (HRP Conjuga)L-亮氨酸叔丁酯鹽酸鹽

異羅漢果皂苷 VVimentin (V9) Mouse mAbN-羥基酞酰亞

鹽酸青藤Hamartin/TSC1 (1B2) Mouse mAb1H-吡唑-1-甲脒鹽酸鹽

鹽酸青藤(標(biāo)準(zhǔn)品)IRF-4 Antibody2,2-二羥甲基酸

脫氧核糖核酸鈉(小牛胸腺)TBR1 (D6C6X) Rabbit mAb2-并咪唑

核糖核酸(酵母)β-Actin Antibody2-并咪唑

-2-甲酰基吡啶β-Actin Antibody鹽酸胍

尿苷-5'-二酸葡萄糖鈉鹽(UDPG)Pan-Actin Antibody甲硫鈉

5-鳥苷一酸二鈉鹽(GMP)Endonuclease G Antibody基吲唑

腺苷-5單酸(進(jìn)口原裝) β-Actin (13E5) Rabbit mAb2,4,6-三肼

唾液酸糖蛋白受體1BMP4/FITC  熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋白4IgG1 Kit

芳香基硫酸酯酶FBMP6/FITC  熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋白6IgG100 ul

A激酶錨定蛋白5BMP-7/FITC  熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7IgG1 Kit

小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3BMP8/FITC  熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋白8IgG100 ul

AS1蛋白BMPR-1A/FITC  熒光素標(biāo)記骨成型蛋白受體1AIgG20 ul

酸化自噬相關(guān)蛋白4BBNP/FITC  熒光素標(biāo)記腦鈉素IgG1 Kit

微絲相關(guān)蛋白1BNP/FITC  熒光素標(biāo)記腦鈉素IgG100 ul

腺苷A1A受體BRN3A /FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白IgG100 ul

芳基硫酸酯酶BBOb-1/FITC  熒光素標(biāo)記B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子IgG100 ul
嗜水氣單胞菌(AH)核酸試劑盒規(guī)格4號染色體開放閱讀框3抗體Ethyl 3,4,5-trimethoxybenzoate中文名:別名:分子式:C12H16O5

組織蛋白酶S抗體Phloracetophene中文名:別名:2',4',6'-Trihydroxyacetophene分子式:C8H8O4

前列腺雄激素抑制信號蛋白1抗體Ethyl 2,4,6-trihydroxybenzoate中文名:2,4,6-三羥基苯甲酸乙酯別名:分子式:C9H10O5

細(xì)胞死亡誘導(dǎo)蛋白抗體1,5-Bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)penta-1,4-diene中文名:別名:分子式:C19H20O4

細(xì)胞質(zhì)脆性X智力低下蛋白結(jié)合蛋白2抗體Mulberrofuran H中文名:別名:分子式:C27H22O6
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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TEL:021-61210612

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