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牡蠣皰疹病毒(OsHV)核酸試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關產(chǎn)品:辣根過氧化物酶標記水通道蛋白-2IgG100 ul酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1BIN1/FITC 熒光素標記橋連整合因子蛋白IgG20 ul酸化活化復制因子2Bim/FITC 熒光素標記細胞死亡調(diào)解子IgG100 ul酸化鈉ATP酶蛋白a1phospho-Bim(Ser55) /FITC 熒光素標記兔
產(chǎn)品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產(chǎn)品名稱 | 牡蠣皰疹病毒(OsHV)核酸試劑盒價格 |
規(guī)格 | 48T |
貨號 | LZP8049 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
羅漢果皂苷ⅢA1Caspase-8 Antibody (Mouse Specific)叔丁基-吡唑-5-
羅漢果皂苷ⅡA2Caspase-8 Antibody (Mouse Specific)四甲基哌啶酮
羅漢果皂苷ⅢePhospho-MFF (Ser146) Antibodyalpha,alpha-二酸
羅漢果黃素Granzyme A AntibodyNA 酸酐
紫草呋喃AAlbumin Antibody2,6-二-5-氟煙酸
白皮杉,3'-羥基白藜蘆;比杉特(標準品)SUMO-1 Antibody5-氨基-1-基吡唑
化琥珀酰膽SUMO-1 Antibody周位酸
化琥珀酰膽(標準品)FAF1 Antibody2-氨基吡啶-5-酸,頻哪酯
多根Phospho-MST1 (Thr183)/MST2 (Thr180) (E7U1D) Rabbit mAb1-金剛烷甲酸
化鎂Claudin-1 Antibody1-氨基-3,二甲基丁-2-酮
苜蓿素(標準品)Claudin-1 Antibody二基膦
人參皂苷Rg5Acinus Antibody-甲酸
兒茶素沒食子酯酸Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb甲氧基肉桂酸
化鎂銨,化銨鎂,六水合化鎂銨Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb苊
(溴基)-5-甲基-1H-吡唑Wee1 Antibody甲基吲哚
訶子林鞣酸53BP1 Antibody酰
訶子鞣質(zhì),訶子鞣酸LINGO-1 Antibody酸
劍麻皂苷元(標準品)Rap1A/Rap1B Antibody阿脲,四氧嘧啶
酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1AQP-2/HRP (aquaporin Proin-2) 辣根過氧化物酶標記水通道蛋白-2IgG100 ul
酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1BIN1/FITC 熒光素標記橋連整合因子蛋白IgG20 ul
酸化活化復制因子2Bim/FITC 熒光素標記細胞死亡調(diào)解子IgG100 ul
酸化鈉ATP酶蛋白a1phospho-Bim(Ser55) /FITC 熒光素標記兔抗、大、細胞死亡調(diào)解子IgG100 ul
酸化鈉ATP酶蛋白a1Bim(phospho Ser87)/FITC 熒光素標記兔抗、大、細胞死亡調(diào)解子IgG20 ul
酰輔酶A羧化酶phospho-Bim(Ser69) /FITC 熒光素標記兔抗、大、細胞死亡調(diào)解子IgG100 ul
酸化酰輔酶A羧化酶BIRC5/FITC 熒光素標記細胞凋亡抑制因子5IgG20 ul
酸化Ack1CD203c/FITC 熒光素標記CD203cIgG100 ul
酸化腺苷單酸活化蛋白激酶α1CD203c/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記抗CD203cIgG100 ul
牡蠣皰疹病毒(OsHV)核酸試劑盒價格C-C元件趨化因子26抗體24-Methylenecycloartal acetate中文名:24-亞甲基環(huán)阿爾廷醇乙酸酯別名:分子式:C33H54O2
趨化素抗體30-Hydroxylup-20(29)-en-3-one中文名:別名:分子式:C30H48O2
補體C2a鏈多肽抗體Wilforlide A中文名:別名:Abruslactone A; Regelide分子式:C30H46O3
著絲粒蛋白C1抗體Rubiarbol B中文名:別名:Rubial h分子式:C30H50O3
16號染色體開放閱讀框72抗體Erythrodiol中文名:古柯二醇別名:高根二醇分子式:C30H50O2