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玉米TPCR檢測試劑盒規(guī)格

產品簡介

酸化蛋白激酶C亞性100 ul

雞白介素6受體(IL-6R)ELISA試劑盒PKB/AKT-1 蛋白激酶B(來源)20 ul

雞白介素6(IL-6)ELISA試劑盒PLASTIN3/T Plastin 絲束蛋白

更新時間:2021-03-13
訪問次數(shù):649
詳細介紹在線留言

注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 玉米TPCR檢測試劑盒規(guī)格

 規(guī)格

 50T

 貨號

 LZP7880

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
四甲基硅烷[>99.0%(GC),用于核磁共振]Phospho-M-CSF Receptor (Tyr809) Antibody氨基-2-甲氧基吡啶

(*基硅基)-1-磺酸鈉(>98.0%(T))Phospho-M-CSF Receptor (Tyr723) (49C10) Rabbit mAb2-溴-5-代

三氟化-絡合物(>98.0%(W))Progesrone Receptor B (C1A2) Rabbit mAb芐氧基吲哚

二甲基硒(>98.0%(GC))IFN-γ (3F1E3) Mouse mAb甲基三氧基硅烷

六氟(>99.0%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) Antibody溴-3,5-二氟

四甲基錫(>96.0%(GC))PDGF Receptor β Antibody3,二甲氧基酚

二二茂鋯(>97.0%(T))PDGF Receptor α Antibody1,2,三-5-

Chirabi-AR[用于核磁共振]cGAS (D3O8O) Rabbit mAb (Mouse Specific)2-氨基-5-硝基-2'-二甲酮

(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)鐠(III)(>98%(T))Zap-70 (D1C10E) XP® Rabbit mAb2,6-二芐

(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)銪(III)(>95%(T))Zap-70 (D1C10E) XP® Rabbit mAb(三氟甲基)吡唑

(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)鐠(Ⅲ)(>97.0%(T))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) (88H8) Mouse mAb2-溴-1--氟

(S)-(+)-1,1'-聯(lián)萘基-2,2'-雙酸氫酯(>97.0%(T))FTO (D6Z8W) Rabbit mAbN-酰-L-氨酸

(R,R)-(-)-2,丁二(>96.0%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr740) (32A9) Rabbit mAbN-芐氧羰基-L-亮氨酸

(S,S)-(+)-2,丁二(>97.0%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr740) (32A9) Rabbit mAb()酸

(+)-芐甲基硅基酸(>98.0%(T))PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb2-甲氧基-氨基吡啶

(-)-芐甲基硅基酸(>98.0%(T))PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb氨基-2-甲氧基吡啶

(-)-樟腦烷酸(>98.0%(T))Phospho-PDGF Receptor α (Tyr849)/PDGF Receptor β (Tyr857) (C43E9) Rabbit mAb2-溴-5-代

(R)-(-)-N-(3,5-二甲酰)-α-Phospho-PDGF Receptor α (Tyr849)/PDGF Receptor β (Tyr857) (C43E9) Rabbit mAb芐氧基吲哚

雞表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒Pin1  肽基脯氨酞順反異構酶Pinl100 ul

雞半糖凝集素-3(Gal-3)ELISA試劑盒Phospho-Pin1 (Ser16)  酸化肽基脯氨酞順反異構酶Pinl20 ul

雞白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒PIWIL1  piwi樣1蛋白100 ul

雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒PKA  蛋白激酶A20 ul

雞白介素8(IL-8)ELISA試劑盒Phospho-PKA C (Thr197)  酸化蛋白激酶C亞性100 ul

雞白介素6受體(IL-6R)ELISA試劑盒PKB/AKT-1  蛋白激酶B(來源)20 ul

雞白介素6(IL-6)ELISA試劑盒PLASTIN3/T Plastin  絲束蛋白T Plastin100 ul

雞白介素4(IL-4)ELISA試劑盒PLC beta 3/Phospholipase C beta 3  酯酶Cβ320 ul

雞白介素3(IL-3)ELISA試劑盒Phospho-PLC beta3 (Ser537)  酸化酯酶Cβ3500µl
玉米TPCR檢測試劑盒規(guī)格9號染色體開放閱讀框57抗體3,4'-Dihydroxy-3',5,7-trimethoxyflavan中文名:別名:分子式:C18H20O6

9號染色體開放閱讀框6抗體5,7-Diacetoxyflavone中文名:別名:分子式:C19H14O6

9號染色體開放閱讀框62抗體Wogonin中文名:漢黃芩素別名:5,7-Dihydroxy-8-methoxyflavone分子式:C16H12O5

9號染色體開放閱讀框64抗體Amarol A中文名:別名:分子式:C15H12O8

9號染色體開放閱讀框66抗體5-Acetoxy-7-hydroxyflavone中文名:別名:分子式:C17H12O5
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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