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產(chǎn)品中心

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當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測(cè)試劑盒  -  50T細(xì)小病毒BPCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

細(xì)小病毒BPCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

超家族成員10抗體Kanshone H中文名:別名:分子式:C15H20O

大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體6α-Hydroxytomentosin中文名:別名:分子式:C15H20O4

IQCD蛋白抗體Citroside A中文名:柑橘苷

更新時(shí)間:2021-03-13
訪問(wèn)次數(shù):513
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組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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 產(chǎn)品名稱

 細(xì)小病毒BPCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

 規(guī)格

 50T

 貨號(hào)

 LZP7832

實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
2-(三氟甲基)吡啶-甲酸(97%)Ambra1 Antibody6-氟煙酸

3,5-二甲酰(98%)eIF4A1 Antibody氟-2-

3,5-二甲酰(99%,用于HPLC衍生標(biāo)記)eIF4A1 Antibody四氫-2H-吡喃-

N-甲基-N-(*基硅基)酰(97%)Phospho-IRS-1 (Ser302) (34C7) Rabbit mAb2-氨基-并噻唑

苔黑酚一水合物(98%)MAVS (D5A9E) Rabbit mAb順-1,二-2-

N,O-雙(*基硅烷基)酰(95%)SirT1 (D739) Antibody二羰基環(huán)戊二鈷

四基(AR)MALT1 Antibody鄰二酰

1-(三氟酰)咪唑(用于GC衍生化,≥98.5%)NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb (PE Conjuga)1,9-二溴壬烷

二硫化碳(低級(jí),≥99.9%)NCBP1/CBP80 (D7Z2Z) Rabbit mAb叔丁基酸-2,二甲基丁二酯

二硫化碳(ACS,≥99.9%)SirT1 (C14H4) Rabbit mAb1-Boc-甲氨基哌啶

2,二溴酰(98%)SirT1 (C14H4) Rabbit mAb5,10,15,20-四(吡啶基)卟啉

二環(huán)己(DCHA)(用于滴定法測(cè)定異酸酯,≥99.5%(GC))LRRC8A/SWELL1 Antibody5--2-酰噻吩

煤油(試劑級(jí))FoxO3a (75D8) Rabbit mAb2-噻吩-5-甲酸

石油(AR,bp 60-90 °C)eIF4G Antibody炔

石油(AR,bp 30-60 °C)FoxO4 (55D4) Rabbit mAbN,N-二甲基酰

石油(AR,bp 90-120 °C)Phospho-SF3B1 (Thr313) (D8D8V) Rabbit mAbN-甲酰

1,1,2-三三氟烷(CFC-113)(99.5%)VE-Cadherin (D87F2) XP® Rabbit mAb2-(二甲氨基)-2-甲基-1-

滑石粉(800目)VE-Cadherin (D87F2) XP® Rabbit mAb2,6-二溴

Dicer-1 ELISA試劑盒MIP-1 Beta  巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 100 ul

DAB2互作蛋白(DAB2IP)ELISA試劑盒MIP4/CCL18  巨噬細(xì)胞炎癥蛋白18100 ul

C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒MITF  小眼相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子100 ul

C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒MMP-1  基質(zhì)金屬蛋白酶-1100 ul

C多肽(CP)ELISA試劑盒MMP-1  基質(zhì)金屬蛋白酶-1100 ul

CXC趨化因子受體7(CXCR7)ELISA試劑盒MMP-2  基質(zhì)金屬蛋白酶-2100 ul

CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA試劑盒MMP-3  基質(zhì)金屬蛋白酶-3100 ul

CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒MMP-7  基質(zhì)金屬蛋白酶-7100 ul

CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒MMP-8  基質(zhì)金屬蛋白酶-820 ul
細(xì)小病毒BPCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格免疫球蛋白超家族成員6抗體Kanshone A中文名:別名:分子式:C15H22O2

免疫球蛋白超家族成員9抗體Isonardoperoxide中文名:別名:分子式:C15H22O4

免疫球蛋白超家族成員10抗體Kanshone H中文名:別名:分子式:C15H20O

大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體6α-Hydroxytomentosin中文名:別名:分子式:C15H20O4

IQCD蛋白抗體Citroside A中文名:柑橘苷A別名:分子式:C19H30O8

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TEL:021-61210612

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