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生肌調(diào)節(jié)因子6100 ulEB病毒核抗原1(EBNA1)(IgG)ELISA試劑盒LAMR1 層粘連蛋白受體1100 ulEB病毒IgA(EBv IgA)ELISA試劑盒MICA/MHC I MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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產(chǎn)品名稱 | 戊型肝炎病毒PCR檢測試劑盒廠家 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7830 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
(95%) (ACS)Cdc42 (11A11) Rabbit mAb間芐
95%藥用酒精 (藥用級)Cdc42 (11A11) Rabbit mAb2-基-甲基-6-并咪唑甲酸
無水(藥用級,99.5%)PTCH1 (C53A3) Rabbit mAb2,6-二甲
(AR,99.7%)PTCH1 (C53A3) Rabbit mAb二甲酯
(GR,99.8%)eIF4G (C45A4) Rabbit mAb羥基-2-硝基吡啶
(ACS,≥99.5%)eIF4G (C45A4) Rabbit mAb-5-(三氟甲氧基)
(工業(yè)級)PTCH2 (G1191) Antibody3,二酸(含有數(shù)量不等的酸酐)
異辛烷(ACS,≥99.0%)PTCH2 (G1191) Antibody溴-1-茚酮
(ACS, ≥99.5%)CD38 (HIT2) Mouse mAb (violetFluor™ 450 Conjuga)鄰溴酸
2-(叔丁氧羰基氧亞氨基)-2-(99%)Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr951) Antibody(溴芐基)-2-丁基-5--咪唑甲
1,2-二()VEGF Receptor 2 Antibody5-羥基-2-吡啶羧酸
2-溴-1,3,5-三異基(96.0 %)Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr996) Antibody二芐基二硫
2,2'-雙(三氟甲基)二氨基聯(lián)(98.0%)Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr996) Antibody吐納麝香
1,二咔唑-9-基(98%)PSA/KLK3 (D11E1) XP® Rabbit mAbα-氨基異丁酸甲基酯鹽酸鹽
(AR,≥99.5%)PSA/KLK3 (D11E1) XP® Rabbit mAb基膦
(CP,≥99%)Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr951) (7H11) Mouse mAbD-手性肌
(anhydrous,99.8%)PITRM1 Antibody藻酸酯
(ACS,≥99.0%)Etk/BMX (D6J1S) Rabbit mAb無水化鎳
EB病毒核抗原3A(IgM)ELISA試劑盒LAMR1(CT) 層粘連蛋白受體1(C端)100 ul
EB病毒核抗原3A(IgG)ELISA試劑盒Myf6 生肌調(diào)節(jié)因子6100 ul
EB病毒核抗原1(EBNA1)(IgG)ELISA試劑盒LAMR1 層粘連蛋白受體1100 ul
EB病毒IgA(EBv IgA)ELISA試劑盒MICA/MHC I MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物120 ul
EB病毒(Ebv)(IgM)ELISA試劑盒Microsporidia protien 蜜蜂微孢子蟲蛋白100 ul
EB病毒(EBv)(IgG)ELISA試劑盒Midnolin isoform Proin 1 中腦核仁蛋白1100 ul
E3泛素蛋白連接酶TRIM68(TRIM68)ELISA試劑盒MIDN 中腦核仁蛋白100 ul
E3泛素蛋白連接酶TRIM68(TRIM68)ELISA試劑盒Midkine 中期因子/肝素結(jié)合生長因子100 ul
D-酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒MLCK 肌球蛋白輕鏈激酶20 ul
戊型肝炎病毒PCR檢測試劑盒廠家6號染色體開放閱讀框165抗體Ophiopogonane F中文名:麥冬二氫高異黃酮F別名:分子式:C20H22O7
6號染色體開放閱讀框168抗體Eupatorin中文名:半齒澤蘭素別名:3',5-Dihydroxy-4',6,7-trimethoxyflavone分子式:C18H16O7
6號染色體開放閱讀框173抗體Alpinumisoflavone acetate中文名:別名:分子式:C22H18O6
6號染色體開放閱讀框182抗體Ophiopogonane A中文名:麥冬二氫高異黃酮A別名:分子式:C18H16O6
6號染色體開放閱讀框186抗體Penduletin中文名:垂葉黃素別名:分子式:C18H16O7
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。