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間日瘧PCR檢測試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關產(chǎn)品:丁香酸別名:分子式:C9H10O5Anti-CD193-Acetoxy-5-methoxystilbene中文名:別名:分子式:C17H16O3磷酸化CD19抗體Methyl 4-hydroxybenzoate中文名:對羥基苯甲酸甲酯別名:分子式:C8H8O3定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
產(chǎn)品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產(chǎn)品名稱 | 間日瘧PCR檢測試劑盒價格 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7625 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
呋塞米(標準品)C22H20O13甲基磺酰酚
加蘭他敏C21H20O101-十六烷基-甲基咪唑四氟酸鹽
吉非羅齊C15H11I3NNaO4(S)-N-叔丁氧羰基-氨基-基-1-
吉非羅齊(標準品)C9H10O7S2-溴-氨基-5-吡啶
格列齊特C14H226-芐基-5,7-二氧代-八氫吡咯并[3,4B]吡啶
格列齊特(標準品)C10H7NO32-氟-5-硝基芐
格列本脲C15H23ClN6O5S5-溴-2-(三氟甲氧基)甲酸
格列本脲(標準品)C19H23NO4四甲基二基二硅氧烷
格列美脲(標準品)C11H10O5甲氧基-2-
格列美脲C15H22N6O5S-5-
灰黃霉素C4H9NO5S氨基煙酸甲酯
灰黃霉素(標準品)C18H24O6S氟酰
透明質(zhì)酸鈉;玻璃酸鈉C18H24O6S6-氮雜吲哚-羧
C30H44O5(S)-(+)-1-基-1,2-二2-甲磺酸酯
(標準品)C6H12O51-溴--5-
右美沙芬C5H12O5對溴芐
右美沙芬(標準品)C24H32O9基肉桂酸
富馬酸伊布利特C16H16O3-N-甲基芐
活化素B(ACV-B)ELISA試劑盒CCR6/CD196 細胞表面趨化因子受體65 mg
活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒CXCR6 細胞表面趨化因子受體6100 ul
活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒CCR7/CD197 細胞表面趨化因子受體7300 ul
黃體生成素(LH)ELISA試劑盒CXCL10/Gamma-IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10100 ul
環(huán)酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒CXCR7/RDC1 細胞表面趨化因子受體7200 ml
環(huán)酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒CCR-8 細胞表面趨化因子受體8100 ul
環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒CCL25/CCR-9 細胞表面趨化因子受體9500 ul
還原型谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒CCL28/MEC 粘膜相關上皮趨化因子28100 ul
花生四酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA試劑盒CCR-10 細胞表面趨化因子受體10100 ul
間日瘧PCR檢測試劑盒價格細胞毒性受體NK-p44抗體Magloside A中文名:別名:分子式:C29H36O15
9號染色體開放閱讀框116抗體Koaburaside momethyl ether中文名:別名:Antiarol glucoside分子式:C15H22O9
卷曲螺旋域蛋白質(zhì)85C抗體Syringic acid中文名:丁香酸別名:分子式:C9H10O5
Anti-CD193-Acetoxy-5-methoxystilbene中文名:別名:分子式:C17H16O3
磷酸化CD19抗體Methyl 4-hydroxybenzoate中文名:對羥基苯甲酸甲酯別名:分子式:C8H8O3