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產(chǎn)品中心

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苛養(yǎng)木桿菌PCR檢測試劑盒廠家

產(chǎn)品簡介

苛養(yǎng)木桿菌PCR檢測試劑盒廠家
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
TTN檢測試劑盒1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;

更新時間:2021-03-13
訪問次數(shù):510
詳細(xì)介紹在線留言

組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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 產(chǎn)品名稱

 苛養(yǎng)木桿菌PCR檢測試劑盒廠家

 英文名稱

 Xylella fastidiosaPCR

 貨號

 LZP7474

實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
VB5Fmoc-Gly-Wang resin 100-200 mesh, Substitution 0.3-0.8mmol/g穿心蓮內(nèi)酯  98%

VB6L-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸鹽 98%熊果苷 99%

VB12L-谷氨酸-5-環(huán)己酯  98%扁桃苷 97%

PLPL-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽 97%扁桃苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

Pyridoxal hydrochlorideL-谷氨酸5乙脂 ≥98.5%胺  分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%(HPLC)

Pyridoxamine 2HCLL-谷氨酸-5-甲酯 98%氫酸胺  98%

Isitol niacinateL-谷氨酸-5-叔丁酯鹽酸鹽 98%牛蒡子苷元 ≥98% (HPLC)

VK4L-谷氨酸二叔丁酯鹽酸鹽 97%牛蒡子苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

VBT(R)-2-氨基-5-叔-丁氧基-5-羰基戊酸  ≥98.5%青蒿素 分析標(biāo)準(zhǔn)品

(±)-Carnitine hydrochlorideBOC-谷氨酰胺-OL   98%積雪草酸  98%

INAHL-谷氨酸-α-芐酯 98% 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%

VPL-谷氨酸雙芐酯對甲苯磺酸鹽 98%土木香內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%(HPLC)

Orotic acidL-谷氨酸對硝基酰苯胺 98%異補(bǔ)骨脂素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

D-Sodium isoascorbiate甘肽 ≥97% (HPLC)蘆薈寧 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%

AstaxanthinGalanin rat ≥97% (HPLC)脫羊藿素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%(HPLC)

Dehydroascorbic acid神經(jīng)節(jié)肽(抗原) ≥97% (HPLC)硫辛酸 98%

鄰硝基氯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)tch1 (5B5) Rat mAbMMP-15  基質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體

間氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)TDP43 (G400) AntibodyMMP-14  基質(zhì)金屬蛋白酶-14抗體

2,5-二甲酚標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)p70 S6 Kinase MCF7 Control Cell ExtractsMMP-13  基質(zhì)金屬蛋白酶13抗體

一氯二溴標(biāo)準(zhǔn)溶液(387±18μg/ml,溶劑:甲)TDP43 (A260) AntibodyMMP-12  基質(zhì)金屬蛋白酶-12抗體

乙標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.807mg/mL,基體:)PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAbMMP-11  基質(zhì)金屬蛋白酶-11抗體

間硝基氯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAbMMP-10  基質(zhì)金屬蛋白酶-10抗體

1,2,3,4-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)MLANA/MART-1 AntibodyMMP-1  基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體

1,2,4-三氯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)Phospho-μ-Opioid Receptor (Ser375) AntibodyMMP-1  基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體

叔戊(Standard for GC,≥99.5%(GC))Rabbit IgG Isotype Control (Alexa Fluor® 647 Conjugate)MMP-1  基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體

2-乙酰吡啶(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-Doublecortin (Ser334) AntibodyMMAA/cblA  甲基二酸尿癥cblA抗體
苛養(yǎng)木桿菌PCR檢測試劑盒廠家G蛋白偶聯(lián)受體γ12抗體Dehydroherbarin中文名:別名:分子式:C16H14O5

G蛋白偶聯(lián)受體γ14抗體Herbarin中文名:別名:分子式:C16H16O6

己糖6磷酸脫氫酶抗體Colelomycerone A中文名:別名:分子式:C17H18O6

生發(fā)中心B淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白2抗體Herbaridine B中文名:別名:分子式:C17H20O6

G蛋白偶聯(lián)受體172B抗體Shiraiachrome A中文名:別名:分子式:C30H26O10

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