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武氏盾螨PCR檢測試劑盒廠家具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn)。公司產(chǎn)品品種齊全,質(zhì)量可靠,擁有完善的售前 售中 售后服務(wù)體系。公司長期與全國各大高校、醫(yī)院以及科研單位保持良好的合作關(guān)系,產(chǎn)品質(zhì)量和服務(wù)精神也得到他們的一致認(rèn)可。
產(chǎn)品分類
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注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 武氏盾螨PCR檢測試劑盒廠家 |
英文名稱 | Acarapis woodiPCR |
貨號 | LZP6326 |
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
人白介素23受體(IL-23R)elisa試劑盒Anti-ABCC8 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 新陳代謝
人β防御素104(DEFB104A)elisa試劑盒Anti-ABCC4 Antibody(原貨號PB0153)研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 新陳代謝 跨膜蛋白
人TH糖蛋白(THP)elisa試劑盒Anti-ABCC8 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝
大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)elisa試劑盒Anti-ABCC8 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白 激酶和磷酸酶 Alzheimer's
大鼠活化素A受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)elisa試劑盒Anti-ABCG1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝
大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)elisa試劑盒Anti-ABCE1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 細(xì)胞類型標(biāo)志物
豬白介素13(IL-13)elisa試劑盒Anti-ABCG2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
小鼠糖類抗原199(CA199)elisa試劑盒Anti-ABCD3 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞膜蛋白
小鼠白介素1β(IL-1β)elisa試劑盒Anti-ABCG2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 干細(xì)胞 表觀遺傳學(xué)
人肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)elisa試劑盒Anti-ABCG2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞膜蛋白
人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)elisa試劑盒Anti-ABCG2 Antibody研究領(lǐng)域 發(fā)育生物學(xué) 干細(xì)胞 糖蛋白
人活化凝血因子X(FXa)elisa試劑盒Anti-ABCG2 Antibody(原貨號PB0380)研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶 表觀遺傳學(xué)
人黑色素濃縮激素(MCH)elisa試劑盒Anti-ABCG5 Antibody研究領(lǐng)域 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 鋅指蛋白 表觀遺傳學(xué)
人核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)elisa試劑盒Anti-ABCG5 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號 表觀遺傳學(xué)
人胱抑素A(CSTA/STF1/STFA)elisa試劑盒Anti-ABCG8 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
Phosphate-solubilizingbacteriamedium
Nutrient Broth incubation media Nutrient Broth
惡臭醋酸桿菌混濁變種 醬油酵母 支/瓶
Baird-ParkerAgarBase
YM11Agar
固體改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 Martin Solid,Modified 250克 生物制品無菌試驗(yàn)的霉菌檢查
PABA培養(yǎng)基(需氧、厭氧菌) PABA Medium(Bacteria) 250克 磺胺類的無菌試驗(yàn)用
PABA培養(yǎng)基(真菌) PABA Medium(Fungi) 250克 已經(jīng)磺胺類及抗生素類藥物治療的患者血液等標(biāo)本培養(yǎng)
聚山梨酯80培養(yǎng)基(需氧、厭氧菌) Tween80 Medium(Bacteria) 250克 油劑的無菌試驗(yàn)
武氏盾螨PCR檢測試劑盒廠家磷酸化上皮鈣粘附分子抗體Isochandalone中文名:別名:分子式:C25H24O5
BRD2蛋白抗體8-Prenylluteone中文名:別名:分子式:C25H26O6
BRD3蛋白抗體Dehydrodeguelin中文名:脫氫魚藤素別名:去氫魚藤素分子式:C23H20O6
磷酸化酪氨酸蛋白激酶6/腫瘤激酶抗體Persicoside中文名:別名:分子式:C23H26O11
磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體Cedeodarin中文名:別名:分子式:C16H14O7