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ROS線粒體活性氧產(chǎn)生速率測試盒熒光法的現(xiàn)貨出售產(chǎn)品:減蛋綜合征病毒血清樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒2836-32-0羥基乙鈉血清樣品沉淀法去內(nèi)毒素試劑盒白鮮堿CAS:484-29-7血影細(xì)胞(GHOST)制備試劑盒加蘭他敏CAS:357-70-0血影細(xì)胞膜熒光染色試劑盒
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號(hào) |
ROS線粒體活性氧產(chǎn)生速率測試盒熒光法 | 100管/96樣 | 氧化與抗氧化系列 | LZ-01410S |
商品介紹:
測定意義
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等,研究表明,機(jī)體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關(guān)。
正常情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平過多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激,同時(shí),活性氧還可攻擊線粒體DNA產(chǎn)生氧化損傷,導(dǎo)致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結(jié)構(gòu)和功能變化。
因此,通過檢測活性氧的變化來判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。
測定原理:
熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴(kuò)散通過線粒體膜,在線粒體內(nèi)被酯酶水解,形成無熒光的DCFH,DCFH迅速與ROS反應(yīng)生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)了利用熒光法直接定量檢測線粒體ROS產(chǎn)生速率的方法。將熒光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)點(diǎn)擬合,線性回歸直線斜率與ROS產(chǎn)生的速率呈正比。
需自備的儀器和用品:
多功能酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì)量和軟件的算法。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)檢測試劑盒香蜂草苷1-烷 99%4-(1-羥乙)吡啶 98%
狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)檢測試劑盒香荊芥酚殼聚糖 脫乙酰度≥95%, ,粘度100-200 mpa.s4(5)-羥咪唑鹽鹽 98%
血管緊張素原(aGT)檢測試劑盒香蘭素羧化殼聚糖 BR,水溶性(R)-3-羥吡咯烷鹽鹽 98%
血管緊張素原(aGT)檢測試劑盒香蒲新苷殼聚糖 低粘度:<200 mPa.s4-苯酯 98%
血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)檢測試劑盒香葉殼聚糖 中粘度200-400 mPa.s2-苯酯 98%
血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)檢測試劑盒香葉木素殼聚糖 高粘度>400 mPa.s3--4-氨吡啶 95%
卵泡抑素(FS)檢測試劑盒香葉木素-7-O-葡萄糖苷D(+)-氨葡萄糖鹽鹽 ≥99%吲哚-2-羧 98%
卵泡抑素(FS)檢測試劑盒香紫蘇D(+)-氨葡萄糖鹽鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品吲哚-3-羧 98%
狀腺素抗體(TAb)檢測試劑盒香紫蘇二亞砜 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)1-環(huán)戊 99%
狀腺素抗體(TAb)檢測試劑盒香紫蘇內(nèi)酯K3 分析標(biāo)準(zhǔn)品1--3-吲哚 97%
兒茶酚(CA)檢測試劑盒消旋山莨菪萘醌 98%5-異噁唑-4- 98%
兒茶酚(CA)檢測試劑盒小白菊內(nèi)酯1000℃節(jié)能箱式電爐 SX-G071033,3-二烯酯 98%
半胱氨抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測試劑盒小檗三正丁氧化膦 95%3--4- 99%
半胱氨抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測試劑盒小檗紅 90%3-(5--1,2,4-噁二唑-3-)苯 97%
乙酰膽受體抗體(AChRab)檢測試劑盒小檗紅硫酯肌 99%4-(5--1,2,4-噁二唑-3-)苯 97%
乙酰膽受體抗體(AChRab)檢測試劑盒小檗硫代硫銨 60%溶液6-吲哚 98%
ROS線粒體活性氧產(chǎn)生速率測試盒熒光法CD93抗體α-氟代-β-氨 Pramipexole 2HCL monohydrate
嗜粒趨化蛋白CCL6抗體α-吡啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinblastine Sulfate
6號(hào)染色體開放閱讀框81抗體α-三聯(lián)噻吩(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinblastine Sulfate
巨噬炎性蛋白1β抗體α-戊二(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinblastine Sulfate
NK抑制性受體2DL4抗體β-Estradiol(標(biāo)準(zhǔn)品) Temozolomide
NK抑制性受體2DS4抗體β-氨(標(biāo)準(zhǔn)品) Temozolomide
NK抑制性受體3DL1抗體β-環(huán)糊精(標(biāo)準(zhǔn)品) Aminoglutethimide
7號(hào)染色體開放閱讀框46抗體(標(biāo)準(zhǔn)品) Aminoglutethimide
蛋白磷酶PP2A癌抑制蛋白抗體(標(biāo)準(zhǔn)品) Flutamide