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SNU398細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

SNU398細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
大黃素甲10000*gelred 核酸染料 biotium 骨髓樣品固著液(Helly或B5或Lowy FMA固著液)
大黃素甲-8-O-β-D-葡萄糖苷PAGE凝膠銀染試劑盒 肌動(dòng)蛋白(ACTIN)結(jié)合分子(binding molecules)檢測(cè)試劑盒

更新時(shí)間:2021-08-30
訪問次數(shù):762
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產(chǎn)品名稱:肝癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:SNU398細(xì)胞

貨號(hào):LZ-X969763
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁

圖片2.jpg 

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺(tái);

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

4'-去甲氧基表鬼臼素Epalrestat;依帕司他酮酸待測(cè)樣品處理試劑盒

5,6-二甲基呫噸酮-4-乙酸4-Methylimidazole;4-甲基咪唑稀酰

5,7-二羥基色原酮2,3,5,4-tetrahydroxyl diphenylethylene-2-o-glucoside;2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷/何首烏苷/二苯乙烯苷病HRP標(biāo)記制備試劑盒

5-O-甲基維斯阿米苷Ofloxacin;氧氟沙星病包裝

5-肌苷一磷酸二鈉鹽Lomefloxacin 洛美沙星波形蛋白(Vimentin)結(jié)合分子(binding molecules)檢測(cè)試劑盒

5-甲基-7-甲氧基異黃酮Pefloxacin  培氟沙星玻璃清潔劑(櫥窗、大門、汽車玻璃等)

5-甲基胞嘧啶Pseudolaric Acid B;土荊皮乙酸薄層色譜分析

5-甲基糠Echinacoside;松果菊苷不溶性GST融合蛋白溶解試劑盒

5-鳥苷一磷酸二鈉鹽Ganciclovir;更昔洛韋部分蛋白酶切多肽譜分析試劑盒

5-羥基-6,7-二甲氧基黃酮3-Indolebutyric Acid/IPA;吲哚酸草莓*培養(yǎng)基

5-羥基-7,8-二甲氧基黃酮Ethyl gallate;沒食子酸乙酯茶葉維生素U(S-Methylmethionine)比色法定量檢測(cè)試劑盒

5-羥基馬鞭草苷Deoxycholic acid;去氧膽酸差異相減雜交試劑盒

5-羥甲基糠β-Sitosterol;β-谷甾產(chǎn)氣莢膜梭菌α素(Clostridium perfringens cpa)鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒

5-羥色鹽酸鹽Voglibose;伏格列波糖產(chǎn)氣莢膜梭菌腸素(Clostridium perfringens cpe)鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒

5-羥色酸Stigmasterol;豆甾腸產(chǎn)性大腸桿菌(Enterotoxigenic E. coli)鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
SNU398細(xì)胞載脂蛋白L4抗體高遷移率族蛋白1(HMGB1)檢測(cè)試劑盒HMGB1 ELISA Kit

載脂蛋白L5抗體高敏三碘狀腺原氨(u-T3)檢測(cè)試劑盒u-T3 ELISA Kit

載脂蛋白M抗體高敏狀腺素(u-T4)檢測(cè)試劑盒u-T4 ELISA Kit

載脂蛋白O抗體高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)檢測(cè)試劑盒HDL-C ELISA Kit

β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體高靈敏度促狀腺激素(U-TSH)檢測(cè)試劑盒U-TSH ELISA Kit

共濟(jì)失調(diào)性眼球運(yùn)動(dòng)功能喪失相關(guān)蛋白AOA1抗體高爾蛋白73(GP-73)檢測(cè)試劑盒GP-73 ELISA Kit

三號(hào)染色體開放閱讀框抗體高半胱氨(Hcy)檢測(cè)試劑盒Hcy ELISA Kit

腺嘌呤磷核糖轉(zhuǎn)移酶抗體干燥綜合征抗原B(SSB)檢測(cè)試劑盒SSB ELISA Kit

磷化水通道蛋白2抗體干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)檢測(cè)試劑盒SCF/MGF ELISA Kit
注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 


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TEL:021-61210612

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