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TF組織因子ELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:Phospho-PLC beta3 (Ser537)/FITC 熒光標(biāo)記化酯Cβ3抗體IgG間氟苯溴化鎂 1.0 M in THFPhospho-PLC gamma 1 (Ser1248)/FITC 熒光標(biāo)記化酯Cγ1抗體IgG正庚溴化鎂 1.0 M in THFPhospho-PLC gamma 1 (Tyr783)/FITC 熒光標(biāo)記化
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | TF組織因子ELISA試劑盒 |
英文名稱 | IF ELISA Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號 | LZ-E028535 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
多巴D2受體(D2R)試劑盒番瀉苷元A茉莉酯 95%鋅 Anhydrous
多巴D2受體(D2R)試劑盒番瀉苷元B7- 98%3.5水鋅 粒度 1~2μm
內(nèi)肽-2(EM-2)試劑盒反式茴香腦己酯 Standard for GC,>99.5%(GC)3.5水鋅 粒度 2~5μm
內(nèi)肽-2(EM-2)試劑盒芳樟己酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7% (GC)3.5水鋅 粒度 6~10μm,防腐級
α-內(nèi)肽(α-EP)試劑盒防己諾林(s)-(+)-α-氧-α-(三氟)苯乙酰 99%氟苯 99%
α-內(nèi)肽(α-EP)試劑盒飛蓬苷(+)-薄荷酯 97%氟化苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 水質(zhì)分析標(biāo)準(zhǔn)溶液,1mg/ml 溶液
抑制素(INH)試劑盒飛蓬酯乙硫代硫鎂 超純級氟苯 Standard for GC ,≥99.6% (GC)
抑制素(INH)試劑盒非洲防己三氟酯 97%氟苯 CP
神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)試劑盒 粉防己N--3-吲哚乙 97%氟苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)試劑盒 風(fēng)信子素4-庚烷 99%己丁酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)
食欲素/阿立新B(OX-B)試劑盒蜂斗菜內(nèi)酯A環(huán)己 98%己丁酯 ≥98%
食欲素/阿立新B(OX-B)試劑盒佛手柑內(nèi)酯4--3- 98%丁位十二內(nèi)酯 98%
促睡眠肽(DSIP)試劑盒佛手柑素(-)2,2′-亞雙(3α,8α-二氫-8H-茚并[1,2--d]噁唑 98%丁乙酯 99%
促睡眠肽(DSIP)試劑盒佛司可林2,2′-亞雙[(4,s)-4-苯-2-噁唑啉] 97%異戊 98%
6-羥多巴(6-OHDA)試劑盒 2,2′-亞雙[(4,s)-4-叔丁-2-噁唑啉] 99%異戊 Standard for GC,>99%(GC)
6-羥多巴(6-OHDA)試劑盒 扶桑甾氮芥鹽鹽 98%異戊 ≥97%,Kosher
TF組織因子ELISA試劑盒MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒是應(yīng)用新型的水溶性甲臢化合物[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁),內(nèi)鹽;MTS]快速高靈敏度檢測細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。
MTS被細(xì)胞生物還原成一種可溶于組織培養(yǎng)基的甲臢化合物,新陳代謝活躍的活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶類將MTS轉(zhuǎn)化成液態(tài)可溶的甲臢化合物,這種甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上測量,而不需要另外作處理。由490nm測量的吸收值所表示的甲臢產(chǎn)物的數(shù)量與培養(yǎng)物中活性細(xì)胞的數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)量呈線性關(guān)系。
MTS溶液可以直接加入到細(xì)胞樣品中,不需要預(yù)配各種成分,MTS溶液很穩(wěn)定,對細(xì)胞沒有毒性,可以長時(shí)間孵育細(xì)胞。MTS法測定細(xì)胞增殖或毒性試驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的靈敏度高,無放射性,檢測細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)的靈敏度比其它方法如MTT,XTT和WST-1高。
儲存條件:2-8℃避光保存。長期不用的分裝后于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
有效期:一年。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。