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產(chǎn)品中心

Product Center

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SOX4轉(zhuǎn)錄因子SOX-4ELISA試劑盒

產(chǎn)品簡介

SOX4轉(zhuǎn)錄因子SOX-4ELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:phospho-GAB2(Ser623) /FITC 熒光標(biāo)記化接頭蛋白Gab2抗體體IgGICP排液管
phospho-GAB2 (Tyr452) /FITC 熒光標(biāo)記化接頭蛋白Gab 2抗體IgGICP進(jìn)樣管
phospho-GAB2 (Tyr643) /FITC 熒光標(biāo)記化接頭蛋白Gab2抗體IgG1-金剛烷 99%
pho

更新時間:2022-05-26
訪問次數(shù):662
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產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

SOX4轉(zhuǎn)錄因子SOX-4ELISA試劑盒

英文名稱

SOX4 ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格

48T/96T

產(chǎn)品貨號

LZ-E028542

需要而未提供的試劑和器材:

1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

2. 高速離心機(jī)

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器

6. 蒸餾水,容量瓶等。

標(biāo)本要求:

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

備試劑與收集血樣:

1.  收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。

2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。

4.  洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)


QQ截圖20200429162339.jpg

檢測程序:

1.  加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:

ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

1)血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

2)血漿:

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

3)尿液:

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:

檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。

5)培養(yǎng)細(xì)胞

檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

6)組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

黑色素激素(MSH)試劑盒辣椒(合成)鹽普魯卡因 分析標(biāo)準(zhǔn)品黃磷 GR(劇品)

黑色素激素(MSH)試劑盒和厚樸酚溴磷 分析標(biāo)準(zhǔn)品過氧乙 AR,18-20%

表皮角蛋白(EK)試劑盒 D-氨葡萄糖-6-硫鹽 99%過氧乙 21-25%

表皮角蛋白(EK)試劑盒 荷葉根皮,二水 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%過氧乙 26-30%

角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)試劑盒 黑介子三()伍環(huán)戊二烯釕(II)六氟磷 96%過氧乙 31-35%

角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)試劑盒 黑芥子硫一水聚乙烯 18-88 Mw ~130,000過氧乙 36-40%

糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)試劑盒 八角聚乙烯 20-98 Mw ~125,000過氧乙 41-45%

糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)試劑盒 紅景天聚乙烯 4-98 Mw ~27,000過氧乙 46-50%

橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)試劑盒 紅景天素五 99%,用于植物培養(yǎng)過氧乙 高純度,醫(yī)用級,5%(1Gal/PE)

橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)試劑盒 紅景天素五標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.1mg/ml過氧乙 15-17%

腫瘤標(biāo)志物(CA724)試劑盒紅-龍膽二糖五 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%發(fā)煙硫 AR

腫瘤標(biāo)志物(CA724)試劑盒紅杉五標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=2%發(fā)煙硫 65%

明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒紅松內(nèi)酯五標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=2%結(jié)晶四化錫 AR,99.0%  

明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒葒草五 97%結(jié)晶四化錫  99.995% metals basis

非小肺癌抗原(LTA)試劑盒葒草素-2-0-B-L半乳糖"硫奎尼丁 USP級硫脲 AR,99%

非小肺癌抗原(LTA)試劑盒厚樸酚2-喹喔啉羧 97%硫脲 CP,98%
SOX4轉(zhuǎn)錄因子SOX-4ELISA試劑盒熒光染料PKH67 是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞,通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞。對細(xì)胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細(xì)胞膜,有著強(qiáng)而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會使鄰近細(xì)胞染色的功能。

在細(xì)胞分裂增殖過程中,PKH67的熒光強(qiáng)度會隨著細(xì)胞的分裂而逐級遞減,標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中,因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。PKH67標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,PKH67標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過流式細(xì)胞儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度),二次(1/4的熒光強(qiáng)度),三次(1/8的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。PKH67可檢測分裂次數(shù)多達(dá)六次甚至更多。

除了用于細(xì)胞增殖檢測,PKH67 還可以用于細(xì)胞的體外盒體內(nèi)示蹤,標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達(dá)穩(wěn)定,陽性標(biāo)記率達(dá)98%以上,標(biāo)記細(xì)胞形態(tài)良好,能有效地觀察細(xì)胞在體外的誘導(dǎo)分化情況;或?qū)?biāo)記的細(xì)胞注入體內(nèi),可以有效的顯示移植細(xì)胞在活體組織中的遷移及分化。

PKH67標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長達(dá)數(shù)周之久,它常被用來做活體細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長期活動的實(shí)驗(yàn)。PKH67 毒性較小,不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患。可以更快速,更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

PKH67標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。

PKH67標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,熒光波長:λex=490 nm,λem=502 nm。

儲存條件:-20℃避光保存。

操作步驟:

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。


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