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FABP脂肪酸結(jié)合蛋白ELISA試劑盒公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:LAG-3/CD223/FITC 熒光標(biāo)記淋巴活化因-3抗體IgG二吡咯烷(N-琥珀酰亞氨氧)碳六氟鹽 98%lamin A/FITC 熒光標(biāo)記核纖層蛋白A抗體IgG代二苯酯 97%Laminin Beta1/FITC 熒光標(biāo)記層粘連蛋白β1抗體IgTPyU 純度≥98%lamin B/FITC 熒光標(biāo)記核纖層蛋白B抗體Ig
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | FABP脂肪酸結(jié)合蛋白ELISA試劑盒 |
英文名稱(chēng) | FABP ELISA Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號(hào) | LZ-E028611 |
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè), 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)試劑盒 育亨賓鄰氨苯 98%2-氟-3-氧苯 97%
脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)試劑盒 愈創(chuàng)甘油3,3-二苯 99%2-氟-4- 96%
過(guò)氧化(GSH-Px)試劑盒 愈創(chuàng)木酚1-二氫茚 99%2-氟-5-三氟 98%
過(guò)氧化(GSH-Px)試劑盒 鳶尾二酰 97%2-氟-6-氧苯 98%
(GSH)試劑盒 鳶尾黃素4-硝肉桂 98%3-氟-4- 97%
(GSH)試劑盒 原阿片苯二 98%4-氟苯 99%
17-類(lèi)固(17-KS)試劑盒 原百部次3,4,5-三氧肉桂 99%2-氟-4-(三氟)苯 97%
17-類(lèi)固(17-KS)試劑盒 原百部二苯(2,4,6-三酰)氧化膦 97%3-羥 97%
17羥皮質(zhì)類(lèi)固(17-OHCS)試劑盒原兒茶槲皮素,二水 97%2-羥苯 97%
17羥皮質(zhì)類(lèi)固(17-OHCS)試劑盒原兒茶槲皮素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%3-羥苯 97%
組織蛋白K(cath-K)試劑盒 原花青素槲皮素 97%4-異喹啉鹽鹽 98%
組織蛋白K(cath-K)試劑盒 原花青素B1槲皮素,二水 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% (HPLC)4-異苯 98%
骨形成蛋白(BMPs)試劑盒原花青素B2L-鼠李糖,一水 99%4-異氧苯 98%
骨形成蛋白(BMPs)試劑盒原七葉皂元二氧化硫脲 98%6-氧-2-萘 97%
視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒原參二4,5-二鄰苯二 98%4-氧-2-三氟 96%
視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒原參三酰肼 90%3-氧羰苯 97%
FABP脂肪酸結(jié)合蛋白ELISA試劑盒NF-κB是一個(gè)多向性核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,可調(diào)節(jié)細(xì)胞因子、趨化因子、粘附分子、生長(zhǎng)因子、免疫受體、氧化應(yīng)激相關(guān)酶、轉(zhuǎn)錄因子、急性時(shí)相蛋白等基因的表達(dá),功能涉及相應(yīng)的許多生理、病理過(guò)程。
DAPI 是一種藍(lán)色核染料,優(yōu)先染dsDNA,DAPI 表現(xiàn)為可集中結(jié)合在DNA 雙鏈的AT 小溝,結(jié)合后的DAPI 熒光會(huì)發(fā)生20 倍增強(qiáng)。同時(shí),DAPI 也可以結(jié)合RNA,與DNA 不同,一般認(rèn)為DAPI 結(jié)合于RNA 的AU 區(qū)。DAPI/RNA 的復(fù)合體(500nm)有比DAPI/dsDNA復(fù)合體(460nm)更長(zhǎng)的熒光波長(zhǎng)。DAPI 是一種常用的多色熒光技術(shù)中的核復(fù)染劑。
NF-κβ作為一種廣泛存在的轉(zhuǎn)錄因子,被激活由胞漿轉(zhuǎn)入胞核,從而參與炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、腫瘤發(fā)生等??梢詫⒓?xì)胞核和NF-κβ分別用DAPI 和FITC 染色,可觀察每個(gè)細(xì)胞是否發(fā)生NF-κβ核轉(zhuǎn)位,并量化分析NFkB 核轉(zhuǎn)位程度以及發(fā)生核轉(zhuǎn)位細(xì)胞的比例。
C-jun 屬于即早基因(immediate early genes,IEGs)成員之一。而即早基因是原癌基因家族成員,常在細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、凋亡、創(chuàng)傷、應(yīng)激等反應(yīng)的早期出現(xiàn)表達(dá)變化。即早基因通常在細(xì)胞內(nèi)作為第三信使,受信號(hào)通路調(diào)節(jié)后作用于核內(nèi)調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄。
儲(chǔ)存:4℃,有效期十二個(gè)月。