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TNFβ腫瘤壞死因子βELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:IGFBP-1/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1抗體IgG鍶 CP,98%IGFBP-2/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2抗體IgG赤 99.999%,塊狀1-5mmIGFBP-3/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3抗體IgG氧化 電子級(jí)IGFBP-4/IBP4/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長(zhǎng)因
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | TNFβ腫瘤壞死因子βELISA試劑盒 |
英文名稱 | TNFβ ELISA Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號(hào) | LZ-E028583 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè), 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
腸病(Enterovirus)試劑盒升麻素氧鹽鹽 98%四鄰苯二酐 98%
腸病(Enterovirus)試劑盒升麻素甜菜,無(wú)水 98%乙酰溴 97%
包蟲(chóng)抗體IgG 試劑盒升麻-3-O-α-L-拉伯糖甜菜,一水 99%溴代炔 99%
包蟲(chóng)抗體IgG 試劑盒圣草次甜菜鹽鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%三溴化磷 ≥99.99% metals basis
百日咳素(PT)試劑盒圣草酚乙酰鈹 97%三溴化磷 99%
百日咳素(PT)試劑盒十七碳酯乙酰鈷(II) 97%三溴化磷 CP,98.0%
白色念珠菌(C.albicans)試劑盒乙酰銅 97%三溴 AR,98%
白色念珠菌(C.albicans)試劑盒石斛酚乙酰鎘 98%二 98%
流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)試劑盒石斛乙酰鉿 97% 99%
流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)試劑盒石榴皮鞣素乙酰鐵 98% ≥99.5%
(Coronaviruses IgG)試劑盒石杉乙酰錳 97% Standard for GC,>99.5%
(Coronaviruses IgG)試劑盒石杉乙乙酰鎳 95% 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7% (GC)
不耐熱腸素B亞單位(LTB)試劑盒 石松靈乙酰鉑(II) 97%醋酯 99%
不耐熱腸素B亞單位(LTB)試劑盒 石蒜乙酰氧釩 99%Amberlyst® 15離子交換樹(shù)脂 濕
沙眼衣原體抗體(CT)試劑盒石蒜裂乙酰鋅 97%Amberlyst® 15離子交換樹(shù)脂 干
沙眼衣原體抗體(CT)試劑盒矢車菊素-3-O-葡萄糖銻粒 99.9999% metals basisAmberlite® IRA-900 陰離子交換樹(shù)脂
TNFβ腫瘤壞死因子βELISA試劑盒Masson三色染色又稱馬松染色,是結(jié)締組織染色中經(jīng)典的一種方法,是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān):分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或藍(lán)的分子量都很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍(lán)色(藍(lán)),主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
產(chǎn)品特點(diǎn):
染色穩(wěn)定。
分化時(shí)間短,一般僅需1~2秒。
色彩清晰鮮艷。
適用范圍廣,適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色。
所染切片保存時(shí)間長(zhǎng)且不易褪色。