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PAF血小板活化因子ELISA試劑盒公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:NKG2D(natural killer cell group 2D) NK細(xì)胞受體/自然殺傷細(xì)胞活化性受體規(guī)格: 0.5mg*Nm23(NDP Kinase A,NDPKA) 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗原規(guī)格: 0.5mg*Nm23-H1 (nucleoside dIPhosphatase kinase A) 腫瘤抑制基因抗原
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | PAF血小板活化因子ELISA試劑盒 |
英文名稱(chēng) | PAF ELISA Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號(hào) | LZ-E028807 |
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè), 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
大鼠αS轉(zhuǎn)移(α-GST)試劑盒 Ehrlich染色液聚二乙烯苯多孔小球GDX-102 80-100目液體石蠟 AR
大鼠同型半胱氨(Hcy)試劑盒改良Harris染色液聚二乙烯苯多孔小球GDX-103 40-60目山梨 AR,99%
大鼠同型半胱氨(Hcy)試劑盒改良Harris染色液聚二乙烯苯多孔小球GDX-103 60-80目苯鈉 CP,99.0%
大鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)試劑盒Mayer染色液聚二乙烯苯多孔小球GDX-104 60-80目磺嘧啶銀 98%
大鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)試劑盒Mayer染色液聚二乙烯苯多孔小球GDX-201 60-80目磺胍 98%
大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)試劑盒伊紅(HE)染色液聚二乙烯苯多孔小球GDX-301 80-100目磺嘧啶 分析標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)試劑盒伊紅(HE)染色液聚二乙烯苯多孔小球GDX-501 60-80目磺嘧啶 98%
大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)試劑盒 Core染色液聚二乙烯苯多孔小球GDX-502 40-60目甜蜜素 藥用級(jí)
大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)試劑盒 Core染色液聚二乙烯苯多孔小球GDX-502 60-80目亞硫氫鈉 CP
大鼠己糖激(HK)試劑盒Carazzi染色液聚二乙烯苯多孔小球GDX-502 80-100目無(wú)水碳鈉 AR,≥99.8%
大鼠己糖激(HK)試劑盒Carazzi染色液玫瑰紅 Indicator無(wú)水碳鈉 GR,≥99.8%
大鼠糖原合成激(GSK)試劑盒Delafield染色液玫瑰紅 AR亞硝鈉 AR,99%
大鼠糖原合成激(GSK)試劑盒Delafield染色液半二酚橙 AR蔗糖 AR
大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)試劑盒Gill染色液(Gill )Ⅲ AR無(wú)水亞硫鈉 anhydrous,CP.95.0%
大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)試劑盒Gill染色液(Gill )Ⅲ CP焦亞硫鈉 ≥99%
大鼠高敏三狀腺原氨(u-T3)試劑盒Gill染色液(Gill No.2)Ⅲ 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥96.0% (HPLC),用于食品分析茶 藥典BP級(jí)
PAF血小板活化因子ELISA試劑盒用途:
肌纖維染色
儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月