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hFOB1.19細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

hFOB1.19細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
谷氨酸受體紅藻氨酸離子1抗體Phospho-Merlin (Ser518) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化2型神經(jīng)纖維瘤抗體IgG
一般受體磷酸肌相關(guān)支架蛋白1抗體NF-L/FITC 熒光素標(biāo)記低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgG

更新時(shí)間:2021-08-30
訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):611
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產(chǎn)品名稱(chēng):SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞;hFOB1.19
英文簡(jiǎn)稱(chēng):hFOB1.19細(xì)胞

貨號(hào):LZ-X968425
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

圖片2.jpg 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺(tái);

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀(guān)察時(shí),盡量縮短觀(guān)察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
大鼠素(REN)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒乙酰鋇阿爾通山線(xiàn)菌拉丁屬名: Candida  krusei

大鼠褪黑素(MT)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒乙酰鋇克魯斯假絲酵母拉丁屬名: Pleurotus ferulae

大鼠C-肽 (C-P) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒二三(1,10-鄰二氮雜菲)釕(Ⅱ)水合阿魏側(cè)耳用途: 與花生共生固氮良好

大鼠降鈣素(CT) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3-乙-3-氧雜丁環(huán)慢生根瘤菌用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。

大鼠促上腺皮質(zhì)激素(ACTH) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3-乙-3-氧雜丁環(huán)鏈霉菌拉丁屬名: Pythium arrhenomanes

大鼠骨保護(hù)素(OPG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Flunarizine 2HCl強(qiáng)雄腐霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

大鼠催乳素(PRL)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Flunarizine 2HCl假蜜環(huán)菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

大鼠肌紅蛋白(MYO)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-烷磺鈉 一水血紅鞘鞍單胞菌拉丁屬名: Aspergillus niger

大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3-溴-5-苯黑曲霉拉丁屬名: 乳粉  三聚

大鼠肌鈣蛋白I(Tn-I)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2--6-煙乳粉  三聚注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPPA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2--6-煙根瘤菌拉丁屬名: Streptomyces   odorifer

大鼠性磷酶(ALP) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒S-芐-L-半胱氨土味鏈霉菌拉丁屬名: Microvirga sp.

大鼠神經(jīng)特異性烯化酶(NSE)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒S-芐-L-半胱氨微小桿菌拉丁屬名: Aspergillus nidulans

大鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,9-二乙酰鳥(niǎo)嘌呤構(gòu)巢曲霉拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

大鼠白介素12 p40(IL-12/p40)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,9-二乙酰鳥(niǎo)嘌呤釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

大鼠白介素12(IL-12)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,9-二乙酰鳥(niǎo)嘌呤聚生殼菌拉丁屬名: Aspergillus versicolor
hFOB1.19細(xì)胞雞糖原合成酶激酶3β(GSK3β)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-IKI3 family protein/FITC  熒光素標(biāo)記擬南芥IKI3抗體IgG

雞生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6(Gas6)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-IKK gamma/FITC  熒光素標(biāo)記核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgG

VII型膠原(COL7)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-IKK alpha/FITC  熒光素標(biāo)記核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgG

雞白介素1受體II(IL-1R2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-IKK beta /FITC  熒光素標(biāo)記核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgG

雞纖維蛋白原α(FGα)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-phospho-IKK gamma (Ser85) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgG

雞胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-phospho-IKK gamma (Ser31) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgG

雞蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-phospho-IKK alpha (Thr23) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgG

雞泛素羧端酯酶L1(UCHL1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-phospho-IKK gamma (Ser376)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgG


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