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MHCC97-L細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:鱗狀癌增強(qiáng)蛋白1抗體N-cadherin /FITC 熒光素標(biāo)記N-鈣粘附分子抗體IgGGα gust抗體CD171/NCAM-L1/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)粘附分子配體1抗體IgG
產(chǎn)品分類(lèi)
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盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀(guān)察時(shí),盡量縮短觀(guān)察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品名稱(chēng):低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞;MHCC97-L
英文簡(jiǎn)稱(chēng):MHCC97-L細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968405
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
載脂蛋白H(ApoH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 磷二氫銨-15N洋蔥伯克霍爾德氏菌拉丁屬名: Flammulina velutipes
載脂蛋白M(ApoM)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 磷二氫銨-15N金針菇(毛柄金錢(qián)菌、冬菇)拉丁屬名: Escherichia coli
載脂蛋白A5(ApoA5)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 鄰烯氧苯大腸埃希氏菌(大腸桿菌)拉丁屬名: Polyporus grammocephalus
載脂蛋白B100(ApoB100)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 鄰烯氧苯棱蓋多孔菌拉丁屬名: Alternaria gaisen
性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF/FGF2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒1-萘乙酯梨黑斑鏈格孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
心鈉肽(ANP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 1-萘乙酯樟疫霉用途: 植物病原物;用于Botryosphaeria系統(tǒng)學(xué)研究
β淀粉樣蛋白40(Aβ40)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 N,N,N,N,-四環(huán)氧-4,4-二氨二苯貝倫格勒座腔菌梨專(zhuān)化型拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
β淀粉樣蛋白42(Aβ42)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 十氫化萘-d18釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
乳脫氫酶A(LDHA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 S-乙酰半胱氨鹽Phoma medicaginis var. medicaginis用途: 食用、藥用
β內(nèi)啡肽(β-EP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 S-乙酰半胱氨鹽松乳菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
骨性磷酶(BALP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4-溴-2-羥苯黃蓋蜜環(huán)菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
骨成型蛋白1(BMP-1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-氧-2--3-吲哚乙粉狀畢赤氏酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
骨成型蛋白10(BMP-10)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-氧-2--3-吲哚乙黑絡(luò)丸拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
骨成型蛋白15(BMP-15)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2--3-(硫)吡釀酒酵母拉丁屬名: Bacillus subtilis
骨形成蛋白6(BMP-6)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2--3-(硫)吡枯草芽孢桿菌用途: 研究
腦鈉素(BNP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2--3-(硫)吡平臍蠕孢菌用途: 固氮
MHCC97-L細(xì)胞雞II型膠原交聯(lián)羧端肽(CTX-II)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-HDAC8 /FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?;?抗體IgG
雞硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2(TBP2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-HDAC9/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?;?抗體IgG
雞相關(guān)漿蛋白A(PAPPA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-HDAC10/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?;?0抗體IgG
雞紅補(bǔ)體受體1 (CR1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-HDAC11/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙酰化酶11抗體IgG
雞精氨酸加壓素受體1A(AVPR1A)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-HDAC12/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?;?2抗體IgG
雞血小板衍生生長(zhǎng)因子受體樣蛋白(PDGFRL)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-CD36L1/SRB1 /FITC 熒光素標(biāo)記高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體IgG
雞前列腺素D合成酶(PGDS)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Heamachrome/FITC 熒光素標(biāo)記血紅素抗體IgG
雞蛋白酶激活受體1(PAR1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-HER2 receptor(NT)/FITC 熒光素標(biāo)記抗c-erbB-2受體抗體(N端)IgG