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HL-60細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

HL-60細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
神經(jīng)甘肽樣肽GALP抗體NCX1/FITC 熒光素標(biāo)記鈉鈣交換蛋白1抗體IgG
甘肽受體2抗體NCX2/SLC8A2/FITC 熒光素標(biāo)記鈉鈣交換蛋白2抗體IgG

更新時(shí)間:2021-08-30
訪問次數(shù):688
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產(chǎn)品名稱:原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞;HL-60
英文簡(jiǎn)稱:HL-60細(xì)胞

貨號(hào):LZ-X968409
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)

圖片2.jpg 

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凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺(tái);

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
骨保護(hù)素(OPG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2,4-二-3,5-二硝三氟苯黑曲霉拉丁屬名: Mucor heterogamus

骨鈣素(OC/BGP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,4-二-3,5-二硝三氟苯異配囊接霉拉丁屬名: Salinispora tropica

免疫球蛋白A (IgA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒間苯異酯熱帶鹽水孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

核因子κB受體激活因子配(RANκL)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒間苯異酯大腸桿菌拉丁屬名: Wautersiella falsenii

免疫球蛋白A1 (IgA1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒間苯異酯Wautersiella falsenii拉丁屬名: Pseudomonas vranovensis

質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒阿替洛爾假單胞菌拉丁屬名: Cochliobolus lunatus

免疫球蛋白A2 (IgA2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒阿替洛爾新月彎孢霉拉丁屬名: Candida heveicola

質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP-11)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒烯酯橡膠樹假絲酵母拉丁屬名: Flavobacterium hydatis

質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒烯酯水生黃桿菌拉丁屬名: Rhizopus japonicus

質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-(三硅)乙日本根霉拉丁屬名: Streptococcus  thermophilus

質(zhì)金屬蛋白酶17(MMP-17)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-(三硅)乙嗜熱鏈球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

質(zhì)金屬蛋白酶24(MMP-24)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-(三硅)乙多主葡萄殼菌拉丁屬名: Flavobacterium  oceanosedimentum

質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4--4’-硝聯(lián)苯海泥黃桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP-8)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4--4’-硝聯(lián)苯粗皮側(cè)耳(平菇)注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,9-二-1,10-菲羅啉紫芝用途: 土壤真菌 有寄生性 可寄生在南瓜花上

質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,9-二-1,10-菲羅啉孢小殼銀漢霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
HL-60細(xì)胞雞角蛋白18(CK-18/KRT18)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  Anti-HINT1/FITC  熒光素標(biāo)記組氨酸三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體IgG

雞蛋白S(PROS)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-HIRA/DGGR1/FITC  熒光素標(biāo)記組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體IgG

雞酮酸激酶M2型同工酶(PKM2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Histone H1/FITC  熒光素標(biāo)記抗組蛋白H1抗體IgG

雞甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Histone H1 (phospho Thr146) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化組蛋白H1抗體IgG

雞蛋白激酶C-ε(PKCε)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Histone H1b/FITC  熒光素標(biāo)記抗組蛋白H1b抗體IgG

雞唾液酸(SA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-Histone H2/HTB901/FITC  熒光素標(biāo)記抗組蛋白H2抗體IgG

L苯氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-Histone H2B/FITC  熒光素標(biāo)記組蛋白H2B抗體IgG

雞糖盞蛋白(GC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Phospho-Histone H2A.X (Ser139) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化組蛋白H2AX抗體IgG


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