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APAF1銜接蛋白酶活化因子1ELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:CD23 人CD23規(guī)格: 48T* 規(guī)格:*IL-1 Alpha 大鼠白介su-1α規(guī)格: 48T*IL-1 Beta 大鼠白介su-1β規(guī)格: 48T*IL-2 大鼠白介su-2規(guī)格: 48T*
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | APAF1銜接蛋白酶活化因子1ELISA試劑盒 |
英文名稱 | APAF1 ELISA Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號 | LZ-E028946 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
白介素12(IL-12)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒-β-D-葡糖錳標(biāo)準(zhǔn)溶液 100µg/mL,體:1%HNO3 FMOC-D-炔甘氨 96%
白介素12 p40(IL-12 p40)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒D-山梨糖錳標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000µg/mL,體:1%HNO3Fmoc-D-烯甘氨 96%
銅藍(lán)蛋白(CP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒D-山梨糖錳粉 99.9% metals basis,粉末FMOC-D-3-(4-吡啶)-氨 98%
α-骨膠原交聯(lián)(α-CTx)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒單葡萄糖N-苯對苯二 98%FMOC-L-3-(3-吡啶)-氨 98%
白分化抗原CD42 (CD42)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒單葡萄糖N-苯對苯二 98%FMOC-L-3-(2-吡啶)-氨 97%
白抗原B27(HLA-B27)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒單葡萄糖N-苯對苯二 98%FMOC-D-3-(2-吡啶)-氨 98%
成纖維生長因子受體2(FGFR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 單葡萄糖1,3-雙(三氟)-5-溴苯 97%FMOC-L-4-氨 98%
腸脂肪結(jié)合蛋白(IFABP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-脫氧-L-核糖3,5-雙(三氟)苯酰 97% FMOC-D-4-氨 98%
脂蛋白a(LP-a)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-脫氧-L-核糖3- 97%FMOC-L-3-氨 98%
髓鞘性蛋白(MBP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-脫氧-L-核糖α,α,α-三氟苯乙 98%FMOC-D-3-氨 98%
端粒(TE)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒L-葡萄糖α,α,α-三氟苯乙 99%FMOC-L-2-氨 97%
組織因子途徑抑制因子(TFPI)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒L-葡萄糖丁炔二二酯 99%FMOC-D-2-氨 98%
血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒L-葡萄糖金剛烷 99.0%FMOC-L-4-溴苯氨 98%
補(bǔ)體因子4 (C4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1,6-二磷果糖二鈣鹽2-金剛烷 98%FMOC-L-2-溴苯氨 98%
鐵蛋白(FE)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1,6-二磷果糖二鈣鹽環(huán)己烷 97%FMOC-L-3,4-二苯氨 96%
免疫球蛋白G(IgG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1,6-二磷果糖二鈣鹽偶氮二二異酯 95%FMOC-D-3,4-二苯氨 96%
APAF1銜接蛋白酶活化因子1ELISA試劑盒用途:
布氏桿菌染色,又稱為科茲洛夫斯基染色或柯茲洛夫斯基染色。
注意事項:
染色結(jié)果為:布氏桿菌呈球桿狀,淡紅色,其他呈綠色。
儲存條件:室溫,避光,12個月