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產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
酸性酯酶染液 | 5ml×4 | LZ-S64042 |
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:血清(漿)可直接測(cè)定。紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說(shuō)明書上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測(cè)定。=
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
人Ⅲ型膠原蛋白(COL Ⅲ)ELISA試劑盒雞腿蘑(毛頭鬼傘)芹菜素-7-O-葡萄糖酸苷
人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒金針菇5-羥基-6,7-二甲氧基黃酮
人3氧代5α類固4脫氫酶2(SRD5A2)ELISA試劑盒珊瑚色諾卡氏菌5-羥基-7,8-二甲氧基黃酮
人3型1-磷酸鞘氨受體(S1P3)ELISA試劑盒蠣灰鏈霉菌去氫荷包牡丹堿
人3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA試劑盒淡天藍(lán)色鏈霉菌去氫吳茱萸堿
人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)ELISA試劑盒抗生鏈霉菌青霉素酶
人3-葡萄糖苷酸孕二(PdG)ELISA試劑盒大麗花輪枝孢千金子甾
人Ⅱ型前膠原羧基端肽(PⅡCP)ELISA試劑盒出芽短梗霉氫化原阿片堿
酸性酯酶染液γ-環(huán)糊精1×PBS緩沖液(0.01M,pH8.0)組織EPHB4激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)胞裂蛋白13(SEPT13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
γ-環(huán)糊精碳酸鹽緩沖液(0.1mol/L,pH9.2) 碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液組織ERK1/2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)胞裂蛋白12(SEPT12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
D-果糖碳酸鹽緩沖液(0.05mol/L,pH9.6) 碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液組織ERK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)胞裂蛋白11(SEPT11)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
D-果糖0.01M檸檬酸鈉緩沖液 pH6.0,干粉組織ERK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)胞裂蛋白10(SEPT10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
D-果糖0.01M檸檬酸鈉緩沖液 pH6.0,干粉組織FAK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)胞裂蛋白1(SEPT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
D-果糖檸檬酸鈉緩沖液0.1mol/L, pH4.5,無(wú)菌溶液 SSC組織FES激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
D-果糖-6-磷酸二鈉檸檬酸鈉緩沖液0.1mol/L, pH4.5,無(wú)菌溶液 SSC組織FGFR1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
D-果糖-6-磷酸二鈉CGS緩沖液(pH7.0) Citrate-Glucose-Saline(CGS)緩沖液 組織FGFR3激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。