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草魚出血熱病毒(GCHV)核酸試劑盒價格

產(chǎn)品簡介

草魚出血熱病毒(GCHV)核酸試劑盒價格
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
標(biāo)記碳酸酐酶2IgG100 ul

蛋白激酶A錨定蛋白6Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白酸酯酶-2B催化亞單位IgG100 ul

肺α/β水解酶蛋白1caldesmon/smooth muscle /FITC 熒光素標(biāo)記鈣調(diào)結(jié)合蛋白/鈣調(diào)素結(jié)合蛋白IgG100 u

更新時間:2021-03-13
訪問次數(shù):554
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注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

 產(chǎn)品名稱

 草魚出血熱病毒(GCHV)核酸試劑盒價格

 規(guī)格

 48T

 貨號

 LZP8057

組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
京尼平苷酸Cre Recombinase (D7L7L) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)2-羥基-5-甲基吡啶

京尼平苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-Jak3 (Tyr980/981) (D44E3) Rabbit mAb2-溴-5-氟

原兒茶酸,3,二羥基甲酸Phospho-Jak3 (Tyr980/981) (D44E3) Rabbit mAb硝酸鍶

原兒茶酸(標(biāo)準(zhǔn)品)DNMT1 (D63A6) XP® Rabbit mAb無水化鈣

原兒茶,3,二羥基甲DNMT1 (D63A6) XP® Rabbit mAb1,4,7,10-四氮環(huán)十二烷四鹽酸鹽

原兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)ERp72 (D70D12) XP® Rabbit mAb硫酸亞鐵銨

甲砜霉素甘氨酸酯鹽酸鹽ERp72 (D70D12) XP® Rabbit mAb2,6-二甲基大茴香

2.二羥基-6-甲基-煙酸酯La Antigen (D19B3) Rabbit mAb過氧化單硫酸鹽

恩拉霉素,持久殺菌素HSP27 (E1J4D) Rabbit mAb (IHC Preferred)溴化基鎂

(+)-兒茶素水合物SimpleChIP® Human γ-Actin Promor Primers硝酸鑭

(+)-兒茶素水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)SGLT1 Antibody基化鎂

(+)-兒茶素(標(biāo)準(zhǔn)品)mTOR (7C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)9-蒽酸

維生素B6,鹽酸吡哆Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser240/244) (D68F8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-溴-氟甲酸

維生素B6(標(biāo)準(zhǔn)品)α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)脫羧雷他定

非達(dá)霉素SimpleChIP® Human γ-Actin Intron 3 Primers嘧啶-5-甲

比枯枯靈,右旋荷包牡丹mTOR (7C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-基吡啶

比枯枯靈,右旋荷包牡丹(標(biāo)準(zhǔn)品)STING (D1V5L) Rabbit mAb (Rodent Preferred)溴-氟甲酸

石杉甲Sox2 (D6D9) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)四氫吡喃-2-甲

細(xì)胞分裂周期蛋白5phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、非受體酪氨酸激酶c-AblIgG100 ul

β淀粉樣肽/Aβ42Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、組蛋白去酰化酶3IgG100 ul

ADCK4蛋白CAD/CPAN/FITC  熒光素標(biāo)記Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶IgG100 ul

抑癌蛋白AIMP3CA I/FITC  熒光素標(biāo)記碳酸酐酶1IgG100 ul

相關(guān)蛋白AKAPCA II /FITC  熒光素標(biāo)記碳酸酐酶2IgG100 ul

蛋白激酶A錨定蛋白6Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC  熒光素標(biāo)記蛋白酸酯酶-2B催化亞單位IgG100 ul

α/β水解酶蛋白1caldesmon/smooth muscle /FITC  熒光素標(biāo)記鈣調(diào)結(jié)合蛋白/鈣調(diào)素結(jié)合蛋白IgG100 ul

水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13p-Caldesmon/FITC  熒光素標(biāo)記酸化鈣介質(zhì)素IgG100 ul

水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14BSmoothened/SMOH /FITC  熒光素標(biāo)記跨膜蛋白SmoothenedIgG100 ul
草魚出血熱病毒(GCHV)核酸試劑盒價格δ氨基乙酰丙酸脫酶抗體Dihydrooxoepistephamiersine中文名:別名:分子式:C21H277

肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體Mangochinine中文名:別名:(1R,2S)-(-)-Mangochinine分子式:C19H224

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體Acetylcephalotaxine中文名:別名:分子式:C20H235

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體2,7-Dihydrohomoerysotrine中文名:別名:分子式:C20H273

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體Cephalocyclidin A中文名:別名:分子式:C17H195
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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TEL:021-61210612

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