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高嶺土(325(44um))AMPKγ2 Antibody(S)-(-)-N-芐基-1-CD45分子(CD45)ELISA試劑盒Mre11/HNGS1 DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11100 ulCD44分子(CD44)ELISA試劑盒Phospho-Mre11 (Ser676) 酸化DNA損傷關(guān)鍵蛋白
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 腺病毒PCR檢測試劑盒說明書 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7835 |
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
分子篩3A(干燥劑用)Phospho-p53 (Ser315) Antibody硫酸奎寧二水合物
分子篩3A(pellets,5 mm)Phospho-p53 (Ser315) Antibody1,二?;?/span>
分子篩3A(pellets,2-3 mm)Wnt5a/b (C27E8) Rabbit mAb1,2-二溴
4A分子篩(20-40目,氣相、液相色譜柱)Wnt5a/b (C27E8) Rabbit mAb環(huán)甲酰
4A分子篩(60-80目,氣相、液相色譜柱)Phospho-AMPKα (Thr172) Antibody2--5-(甲氧基)嘧啶
4A分子篩(80-100目,氣相、液相色譜柱)Phospho-AMPKα (Thr172) Antibody基酸
分子篩4A(2mm-3mm,干燥劑用 )AMPK-alpha Antibody2-二吡啶基酮
分子篩4A(beads,8 mesh )AMPK-alpha Antibody四基溴化膦
分子篩4A( beads,8-12 mesh)p53 (1C12) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-氟-5-硝基吡啶
分子篩, 5 Å(20-40目,氣相、液相色譜柱)GLI1 (V812) Antibody酸鋰
分子篩, 5 Å(40-60目,氣相、液相色譜柱)GLI1 (V812) Antibody2,6-二甲氧基萘
分子篩, 5 Å(60-80目,氣相、液相色譜柱)EGR1 (44D5) Rabbit mAb (PE Conjuga)2,6-二羥基萘
分子篩, 5 Å(80-100目,氣相、液相色譜柱)Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb甲氧基環(huán)戊烷
分子篩, 5 Å(干燥劑用)Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb四[3,5-雙(三氟甲基)基]酸鈉水合物
分子篩, 5 Å(pellets,5 mm)Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb6-基吡啶-2-羧酸
分子篩, 5 Å(pellets, 2.5-3.5 mm)SLP-76 (E4N7E) Rabbit mAb2-溴-三氟甲氧基
高嶺土(CP)β-Canin (D10A8) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)2-溴-5-甲
超細(xì)高嶺土(325(44um))AMPKγ2 Antibody(S)-(-)-N-芐基-1-
CD45分子(CD45)ELISA試劑盒Mre11/HNGS1 DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11100 ul
CD44分子(CD44)ELISA試劑盒Phospho-Mre11 (Ser676) 酸化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11300 ul
CD44變體6(CD44-v6)ELISA試劑盒MPO 髓過氧化物酶100 ul
CD3分子(CD3)ELISA試劑盒MR(Mineralocorticoid receptor) 鹽皮質(zhì)激素受體100 ul
CD34分子(CD34)ELISA試劑盒MRP1 多藥耐藥相關(guān)蛋白120 ul
CD30分子(CD30)ELISA試劑盒MRP2 多藥耐藥相關(guān)蛋白2100 ul
CD22分子(CD22)ELISA試劑盒MRP3 多藥耐藥相關(guān)蛋白3100 ul
CD209分子(CD209)ELISA試劑盒MRP4/ABCC4 多藥耐藥相關(guān)蛋白420 ul
CD19分子(CD19)ELISA試劑盒MRP5/ABCC5 多藥耐藥相關(guān)蛋白5100 ul
腺病毒PCR檢測試劑盒說明書B7-H4抗體Taxifolin 3-O-xyloside中文名:別名:分子式:C20H20O11
β分泌酶抗體3-Hydroxy-5,7-dimethoxy-3',4'-methylenedioxyflavan中文名:別名:分子式:C18H18O6
相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體Taiwanhomoflavone B中文名:別名:分子式:C32H24O10
BaxDihydroobovatin中文名:別名:分子式:C20H20O4
牛血清白蛋白抗體Epicatechin pentaacetate中文名:別名:分子式:C25H24O11