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寄生水霉PCR檢測試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:Amebiasis檢測試劑盒根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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產(chǎn)品名稱 | 寄生水霉PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Saprolegnia parasiticaPCR |
貨號 | LZP7273 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
Ginseside Rb11,2,4-丁三 standard for GC, ≥99.5% (GC)1-溴-2-氯乙烷 98%
Ginseside Rb2乙氧基喹啉 90%1,3-二溴烷 98%
Ginseside Rb3雙氯青霉素 分析標準品1,3-二溴烷 99%
Ginseside Rc油桶堆高車1,5-二溴戊烷 98%
Ginseside Rd手動液壓搬運車 澳津NP型 載重2T 1220*6801,1,2,2-四溴乙烷 98%
Ginseside Re2-氯吡啶 99%1,2,3-三溴烷 97%
Ginseside Rf環(huán)己 99%埃博霉素B ≥98% (HPLC)
Ginseside Rg12,6-二氯吡啶 97%硫酸長春堿 分析標準品,≥97%(HPLC)
Ginseside Rg22,3-二氯苯甲酸 97%硫酸長春堿 ≥97%(HPLC)
Ginseside Rg32,3-二氯苯甲 98%4,4'-二氨基二苯 分析標準品
Ginseside Rg44-氨基聯(lián)苯 AR4,4'-二氨基二苯 97%
Ginseside Rg53-氨基-4-羥基吡啶 96%4,4'-二氨基二苯 99%
Ginseside Rg6(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙 99%4,4′-二氨基二苯 Standard for GC,≥99.0% (GC)
Ginseside Rh1(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙 99%酸 97%
20(S)-Ginseside Rh24-(氯甲基)苯甲酰氯 98%酸 分析標準品
Ginseside Rh3三乙基氯硅烷 98%酸鈉 97%
2,5-二苯基惡唑(>98%,BC)ANP32A (D7Z5U) Rabbit mAbPhospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體
乙酸鈉(>98%,BR)Malic Enzyme 2 (E1N3E) XP® Rabbit mAbPhospho-p95/NBS1 (Ser343) 磷酸化DNA修復蛋白NBS1抗體
司班60Malic Enzyme 2 (E1N3E) XP® Rabbit mAbphospho-p95 NBS1(Ser343) 磷酸化滑膜細胞凋亡抑制物1抗體
二氧化鈦(>99%,BR)MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)Phospho-p90RSK(Ser380) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體
三苯基磷(>98%,BR)Acetyl-Histone H3 (Lys27) (D5E4) XP®Rabbit mAb (PE Conjugate)Phospho-p90RSK (Thr573) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體
曲拉通X-405(69.0~71.0%)TFF1/pS2 (D2Y1J) Rabbit mAbPhospho-p90RSK (Thr359/Ser363) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體
尿胰蛋白酶抑制劑SPT6 (D6J9H) Rabbit mAbPhospho-p73(Tyr99) 磷酸化P73腫瘤抑制基因抗體
氧化鋅(>98%,BC)VCAM-1 (D8U5V) Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor®488 Conjugate)Phospho-p70 S6 Kinase Beta 2 (Tyr389) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體
1,6-己二胺(>98%,BR)LAMP1 (D4O1S) Mouse mAbPhospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體
2,4-二氯苯氧基乙酸鈉(>98%,BR)LAMP1 (D4O1S) Mouse mAbphospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體
寄生水霉PCR檢測試劑盒價格小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT5克
小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT25克
小鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT5克
小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。