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不明血吸蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格

產(chǎn)品簡介

不明血吸蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
ADV-IgG檢測試劑盒其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測

更新時(shí)間:2021-03-13
訪問次數(shù):466
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注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

 產(chǎn)品名稱

 不明血吸蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格

 英文名稱

 Schistosoma incognitumPCR

 貨號

 LZP7280

實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
Micraic acid A(5-羧基戊基)三苯基溴化磷  98%對甲 98%

Mogroside V氯己定 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%一次性注射器 10ml

Mogroside II-A24-基芐氯 98%塑料尖底離心管 1.5ml

Mogroside IIe氯己定 98%電加熱套 1000ml

Mogroside III-A13,5-二甲酰氯 97%電加熱套 500ml

Mogroside III2,5-二氯苯甲酸 97%電加熱套 250ml

Mogroside IVa2,3-二甲酸 98%防濺球(緩沖球) 100/29,24

Mogroside IV2,4-二甲酸 98%三路真空接受管  24,24*3

Mogroside IVe2,2-二甲基丁酸 98%刺形分餾頭 14.14 24.24

Mogroside VI2,5-二甲酸 98%蒸餾頭75度14,24,24

Momordicine I2,4-二氯-5-磺酰胺基苯甲酸 98%塑料勺/木勺 硬質(zhì),中號

Momordicoside F13,5-二氨基苯甲酸 98%調(diào)藥棒(玻璃棒)330mm

Momordicoside G3,5-二硝基楊酸 98%燒杯 500ml

Momordicoside I aglycone3-基苯甲 99%燒杯1000ml

Momordicoside K4-基苯甲 98%燒杯2000ml

Momordicoside L對氟苯甲酸乙酯 99%淀粉化試紙

鹽酸苯胺(>99%,BR)Acetyl-α-Tubulin (Lys40) (D20G3) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)phospho-NFKBIA(Tyr305)  磷酸化IKB alpha抗體

聯(lián)苯胺(>98%,BR)Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAbphospho-NFKBIA(Ser32/36)  磷酸化IKB alpha(Ser32/36)抗體

Big CHAP(>98%,BR)Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAbPhospho-NFKBIA (Tyr42)   磷酸化IKB α抗體

C12E8 10%溶液Nav1.1 (D8X1Y) Rabbit mAbPhospho-NFKB2(Ser866+Ser870)  細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體

氟化鈣(>98%,BR)HSL (D6W5S) XP® Rabbit mAbPhospho-NFKB1(Thr932)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體

硬脂酸鈣HSL (D6W5S) XP® Rabbit mAbPhospho-NFKB1(Ser933)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體

咔唑(>95%,BR)Liprin β1 AntibodyPhospho-NFKB1(Ser907)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體

香柏油Ghost Dye™ Red 780 Viability DyePhospho-NFKB1(Ser903)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體

硝酸鈰六TRAF4 (D1N3A) Rabbit mAbPhospho-NFKB1(Ser893)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體

硫酸鈰八(>97%,BR)Syntaxin 1A (D4E2W) Rabbit mAbPhospho-NFKB1(Ser338)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體
不明血吸蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光25克

小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光100克

小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光10克

小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

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TEL:021-61210612

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