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海豹分支桿菌PCR檢測試劑盒價格

產(chǎn)品簡介

海豹分支桿菌PCR檢測試劑盒價格
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
PMN Elastase檢測試劑盒在凍存之前,必須預(yù)留一定的體積空間,以免發(fā)生污染或玻璃瓶破裂

更新時間:2021-03-13
訪問次數(shù):533
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注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

 產(chǎn)品名稱

 海豹分支桿菌PCR檢測試劑盒價格

 英文名稱

 Mycobacterium pinnipediiPCR

 貨號

 LZP7013

組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
SH-SY5Y細(xì)胞培養(yǎng)基?報價Anti-GALNT14研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶

重樓皂甙VII76296-75-8實(shí)驗方法Anti-EDR1/PHC1研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 細(xì)胞凋亡

DEAE纖維素DE-32價格Anti-ERMAP研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

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去氧野艽霉素鹽酸鹽實(shí)驗步驟Anti-EWSR1/EWS研究領(lǐng)域  腫瘤

地塞米松溶液 ,50mg/mL1mL說明書Anti-Exonuclease 1研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 激酶和磷酸酶

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KI-67抗原(MKI67)elisa試劑盒Anti-EXOSC3研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 生長因子和激素 激酶和磷酸酶 細(xì)胞膜受體

異補(bǔ)骨脂素Ezrin/Radixin  埃茲蛋白(多肽)UBE2E2  泛素蛋白連接酶2E2抗體

肉桂酸F1 operon positive regulatory protein(NT)  鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽)UBE2D4  泛素蛋白連接酶D4抗體

肉桂F1 operon positive regulatory protein(CT)  鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端多肽)UBE2D3  泛素蛋白連接酶D3抗體

肉桂FABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain)  腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原UBE2D2  泛素蛋白連接酶D2抗體

果糖FADD (Fas-associated protein with death domain)  Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗原UBE2D1  泛素蛋白連接酶D1抗體

芒果苷FAK(Focaladhesin kinase)  粘著斑激酶抗原UBE2C  泛素蛋白連接酶C抗體

新芒果苷phospho-FAK(pTyr577)  磷酸化粘著斑激酶抗原Ube2B  泛素激活酶2B抗體

DL-薄荷phospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase)  磷酸化粘著斑激酶抗原UBE2A/UBE2B/RAD6  泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體

FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase)  Fas活化的絲/蘇氨酸激酶抗原Ube1L/UBE2  泛素激活酶2(泛素激活酶E1相關(guān)蛋白抗體)

R型人參皂苷Rh1FBN1 (fibrillin 1)  原纖維蛋白1抗原UBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme  泛素激活酶E1抗體
海豹分支桿菌PCR檢測試劑盒價格2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃100u

25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃10毫克

26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:0.5毫升

28S抗核糖體抗體(28SrRNP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500毫升

3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:10克

5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:250克
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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