Product Center
牛鼻炎病毒通用PCR檢測試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關產品:HBsAb檢測試劑盒 IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細胞介素-1β)(多肽抗原)IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受體相關蛋白樣1前體蛋白(抗原)
產品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關文章
RELATED ARTICLES注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 牛鼻炎病毒通用PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Bovine Rhinitis Virus (BRV) RTPCR |
貨號 | LZP6501 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
?
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
人干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa試劑盒Anti-MAPK3 Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 轉錄調節(jié)因子
人補體因子H(CFH)elisa試劑盒Anti-MAPK6 Antibody研究領域 心血管 細胞生物 神經生物學 信號轉導 激酶和磷酸酶 細胞膜受體
人丙氨酸轉氨酶/谷丙轉氨酶(ALT/GPT)elisa試劑盒Anti-MAPK8 Antibody研究領域 細胞生物 神經生物學 信號轉導 激酶和磷酸酶 細胞膜受體
人八聚體轉錄因子(OTF2B)elisa試劑盒Anti-MAPT Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 信號轉導 生長因子和激素 激酶和磷酸酶 細胞膜受體
人β抑制蛋白2(ARRB2)elisa試劑盒Anti-MAPK8 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 神經生物學 生長因子和激素
人α半乳糖苷酶(αGAL)elisa試劑盒Anti-MAS1 Antibody研究領域 腫瘤
人KI-67抗原(Ki-67)elisa試劑盒Anti-MAPK9 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 神經生物學 信號轉導
人Egl九同源物1(EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137)elisa分析檢Anti-MASP2 Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 染色質和核信號 神經生物學 信號轉導 表觀遺傳學
人c-fos elisa試劑盒Anti-MAVS Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 染色質和核信號 神經生物學 信號轉導 表觀遺傳學
人Ⅱ型前膠原N端前肽(PⅡNP)elisa試劑盒Anti-MATN3 Antibody研究領域 免疫學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節(jié)因子
牛血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)elisa試劑盒Anti-MB Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 染色質和核信號 神經生物學 信號轉導 表觀遺傳學
牛心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)elisa試劑盒Anti-MAX Antibody研究領域 腫瘤 轉錄調節(jié)因子
貓腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒Anti-MB Antibody研究領域 免疫學 神經生物學 信號轉導 干細胞 激酶和磷酸酶
貓孕激素/孕酮(PROG)elisa試劑盒Anti-MBD1 Antibody研究領域 神經生物學 信號轉導 干細胞 激酶和磷酸酶
雞肺炎支原體(MP)抗體(IgG)elisa試劑盒Anti-MBD2 Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 信號轉導 轉錄調節(jié)因子 激酶和磷酸酶
活性炭(顆粒)Activated carbon (particle)AR1000g
H6002-5GL-xy7xyproline L-羥脯安酸51-35-45g31
H9377-1gHypoxanthine 次皇嘌呤68-94-01g
Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit100T
噻唑蘭1g
餅酮(易志讀-3)¤eetoneHPLC500ml
ST-050-X0.5 ml 螺口尖底凍存管(琥珀色)(無蓋)159
CS10491-500mgStreptozotocin 鏈脲佐菌素18883-66-4500mg
D-阿拉伯糖100g
γ-牛血球蛋白10g
大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒 ,英文名: INS ELISA Kit
人抗人絨毛膜促性腺激素抗體(AhCGAb)ELISA檢測試劑盒Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit 96T/48T
大鼠α-輔肌動蛋白1(ACTN-1)免疫試劑盒 Rat α-Actinin 1, ACTN-1 ELISA Kit
CLIAKitforST3(HumanSomelysin-3)ELISAKit人基質裂解素規(guī)格:48T/96T
人血液C-反應蛋白(C-RP)免疫比濁法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitai-Mi2-Ab人抗Mi2抗體規(guī)格:48T/96T
牛鼻炎病毒通用PCR檢測試劑盒價格白介素-22受體抗體4α,8β-Dihydroxyeudesm-7(11)-en-12,8α-olide中文名:別名:分子式:C15H22O4
白介素26抗體Chlorantholide D中文名:別名:8-Hydroxy-2-oxoeudesma-3,7(11)-dien-12,8-olide分子式:C15H18O4
白細胞介素-20抗體Chlorantholide A中文名:別名:2-Oxoeudesma-3,7(11),8-trien-12,8-olide分子式:C15H16O3
抑制素βC抗體4,5-Dihydroblumel A中文名:別名:分子式:C13H22O3
抑制素βB/Inhibin β B抗體Macrocarpal J中文名:大果桉醛J別名:分子式:C28H42O7
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。