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貝巴魯病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:P-PKC檢測(cè)試劑盒 二乙二醇二甲醚N-亞硝基二苯胺硝酸益康唑麥芽酚
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION?
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 貝巴魯病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 |
英文名稱 | Bebaru Virus(BEBV)RTPCR |
貨號(hào) | LZP6453 |
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
人白喉抗體(Diphtheria Ab)elisa試劑盒Anti-HDAC5 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞凋亡
人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)elisa試劑盒Anti-HDAC5 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 生長(zhǎng)因子和激素
人Salusin Beta(Salusin β)elisa試劑盒Anti-HDAC6 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
人P2蛋白抗體(IgM)elisa試劑盒Anti-HDAC6 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)elisa試劑盒Anti-HDAC7 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞類型標(biāo)志物 新陳代謝 線粒體
人Dickkopf 1(DKK1)elisa試劑盒Anti-HDAC8 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 干細(xì)胞
人CC趨化因子受體7(CCR7)elisa試劑盒Anti-HECTD3 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa試劑盒Anti-HDAC9 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(CTX-I)elisa試劑盒Anti-Hepatitis B Virus Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué)
人15-epi-氧脂素 A4(15-epi-LXA4)elisa試劑盒Anti-HDGF Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué)
犬成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF23)elisa試劑盒Anti-HEXA Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 新陳代謝
牛胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)elisa試劑盒Anti-HEXA Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞粘附分子
牛胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)elisa試劑盒Anti-HERC5 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 干細(xì)胞 合成與降解
牛血小板活化因子乙酰解酶(PLA2G7)elisa試劑盒Anti-HEXB Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞膜受體
牛細(xì)胞色素b-245重鏈(CYBB)elisa試劑盒Anti-HFE Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
變色硅膠Silica gel,self indicator500g
SCT-150-C1.5 ml 螺口尖底凍存管(無(wú)色)(帶蓋)116
G8751-500MGGlycogen Type II 糖原II9005-79-2500mg
Cell lysis buffer for Western and IP500ml
辛?;?/font>-N-甲基葡糖胺1g
本BenzeneGCS2ml
SM0313GeneRuler 1kb DNA Ladder, ready-to-use205
C9887-100GChloramine T 錄胺T
膽固醇50g
Vancomycin xy7chloride250mg
大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腺病毒36抗體(AdV36-Ab)免疫試劑盒 Human Adevirus 36 Aibody,AdV36-Ab ELISA kit
(H2O2)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISA試劑盒大鼠Smad7ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHepatitisCvirusIgG,HCV-IgGELISA試劑盒人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanL-phenylalanine,LPAELISAKit人苯丙氨酸(LPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
貝巴魯病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格γ-微管蛋白GCP6抗體5-O-Ethylcleroindicin D中文名:別名:分子式:C10H16O4
β-葡萄糖苷酶1抗體5-Hydroxymethyl-2-furoic acid中文名:5-羥甲基-2-糠酸別名:5-Hydroxymethyl-2-furancarboxylic acid分子式:C6H6O4
甘氨酸裂解系統(tǒng)H蛋白抗體(2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol中文名:別名:分子式:C30H50O
15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體Solanesol中文名:茄尼醇別名:分子式:C45H74O
淀粉結(jié)合域蛋白1抗體Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dieate中文名:別名:分子式:C19H34O3