Product Center
嗜吞噬細胞無漿體PCR檢測試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:CACT檢測試劑盒科瑪嘉李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
RELATED ARTICLES組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
?
產(chǎn)品名稱 | 嗜吞噬細胞無漿體PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Anaplasma phagocytophilumPCR |
貨號 | LZP6369 |
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
人補體1抑制物抗體-IgG(C1INH-IgG)elisa試劑盒Anti-CCN2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 表觀遺傳學(xué)
人鼻病毒(RV)抗體(IgA)elisa試劑盒Anti-CCN2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 染色質(zhì)和核信號 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 轉(zhuǎn)運蛋白
人白三烯E4(LTE4)elisa試劑盒Anti-CCN2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
人白介素28A(IL-28A/IFN-λ2)elisa試劑盒Anti-CCL8 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞類型標(biāo)志物 新陳代謝
人白介素1β(IL-1β)elisa試劑盒Anti-CCN3 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝
人癌癥促凝素(CP)elisa試劑盒Anti-CCNA1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 生長因子和激素 表觀遺傳學(xué)
人β4整合素(ITG β4/CD104)elisa試劑盒Anti-CCNA2 Antibody(原貨號PB0402)研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué)
人α-防御素4(NP-4)elisa試劑盒Anti-CCNB1 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 表觀遺傳學(xué) 泛素
人Toll樣受體4(TLR4)elisa試劑盒Anti-CCNA1 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 表觀遺傳學(xué)
人STEAP家族成員1(Steap1)elisa試劑盒Anti-CCNB1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
人Seryl- tRNA合成酶 細胞質(zhì)(SARS/SERS)elisa試劑盒Anti-CCNB1 Antibody(原貨號PB0130)研究領(lǐng)域 細胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 轉(zhuǎn)運蛋白 表觀遺傳學(xué)
人Q熱科克斯體2(Q fever)抗體(IgG)elisa試劑盒Anti-CCNB2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
人P27蛋白(P27)elisa試劑盒Anti-CCNB2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞外基質(zhì)
人IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)elisa試劑盒Anti-CCNB1 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 表觀遺傳學(xué)
人EB病毒衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgM)elisa試劑盒Anti-CCND2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 生長因子和激素 細胞粘附分子
Fraser肉湯增菌液(FB)基礎(chǔ)26080250g李斯特氏的選擇性增菌培養(yǎng)(SN/T0-2005,ISO標(biāo)準(zhǔn))。
MRS 肉湯 (CM0359) Oxoid incubation media MRS 肉湯 (CM0359) Oxoid
師崗鏈霉菌 支/瓶
SimmonsCitrateAgar
瓊脂培養(yǎng)基L 250g 沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
M-腸球菌瓊脂 M-Enerococcus Agar 250克 濾膜法或直接平板法,從自來水、食品或其他標(biāo)本中分離腸球菌
緩沖蛋白胨水增菌液 BPW 250克 沙門氏菌前增菌培養(yǎng)和李氏菌前增菌培養(yǎng)
胰酶大豆酵母浸膏肉湯 TSYEB 250克 單核細胞和李斯特菌增菌培養(yǎng)
胰酶大豆酵母浸膏瓊脂 TSYEA 250克 單核細胞和李斯特氏菌的分離培養(yǎng)
嗜吞噬細胞無漿體PCR檢測試劑盒價格兔表皮干細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔腸粘膜上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔成骨細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔垂體細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔單核細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
兔膽囊上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶