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elisa試劑盒的主要檢測(cè)條件有哪些?

更新時(shí)間:2022-05-16點(diǎn)擊次數(shù):554
   elisa試劑盒常用的方法有雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。該試劑盒的專一性強(qiáng),抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。
  elisa試劑盒主要檢測(cè)條件如下:
  1.elisa加樣
  elisa一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本→加酶結(jié)合物→加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、待其收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。
  一般說(shuō)來(lái),5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存??捎米鱡lisa測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份,elisa試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保留。
  2.固相載體
  加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液過(guò)程迅速完成。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
  好的儀器和準(zhǔn)確的操縱是保證elisa試劑盒檢測(cè)結(jié)果正確可靠的必要條件。elisa頂用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定,有些則需經(jīng)預(yù)處理。
  3.標(biāo)本因素
  血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)留意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開釋出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的elisa測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過(guò)久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法elisa中可使本底加深。

TEL:021-61210612

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