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探討大鼠ELISA試劑盒應(yīng)用時的檢測程序

更新時間:2021-11-10點擊次數(shù):609
   大鼠ELISA試劑盒用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用。
  大鼠ELISA試劑盒試驗時制備試劑與收集血樣:
  1.收集標(biāo)本
  血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。正常標(biāo)本測定前用標(biāo)本稀釋液作1:10稀釋。
  2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制
  使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,1管加標(biāo)本稀釋液900ul,2-8管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在1管中加入10ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至2管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第7管中吸出500ul棄去。第2管為空白對照。
  3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。
  4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)。
  相關(guān)檢測程序:
  1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘;
  2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干;
  3.每孔中加入第一抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘;
  4.洗板:同前;
  5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘;
  6.洗板:同前;
  7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘;
  8.每孔加入100ul終止液混勻;
  9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。

TEL:021-61210612

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