777影院,精品人妻一区,男生桶女生,亚欧免费无码Aⅴ在线观看

歡迎進(jìn)入上海聯(lián)祖生物科技有限公司網(wǎng)站!
13482402338
技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

當(dāng)前位置:首頁  -  技術(shù)文章  -  番鴨細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒使用步驟

番鴨細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒使用步驟

更新時間:2021-05-25點擊次數(shù):821

番鴨細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR檢測試劑盒使用步驟:

一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DN段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

TEL:021-61210612

掃碼加微信

中出视频网站大全| 久久11| 久久久毛片免费播放| 日韩一品大道| 先锋影音av在线| 蜜臀精品视频少| 啪啪啪 99自拍| 色咪咪综合网| 亲爱的老师3电影中文字幕| 久热综合在线| 干干干干干干干干精品| 大香蕉大香蕉| 欧美熟妇色xxxx| 六月伊人网| 麻豆精品电影一区二区| 狠狠干欧美| 久久国产精品波多野结衣AV| 久久综合给合| 伊人激情5月四射| 欧美色网| 99精品视频九九精品视频| 又爽又色禁片100| 依人成人网站| 欧美深夜久久不卡| 亚洲精品卡一卡三卡四卡乱码| 精品亚洲国产9191| www.玖草| 国产 日韩欧美 一区| 午夜熟女插插XX免费视频| 色噜噜色综合| 日韩欧美大陆国产| xxx极品变态国产| 无码一级| 99九九视频| 8050午| 黄片一区二区在线| 91精品国产综合久久久蜜臀图片| 狠狠操夜夜爽| 高跟鞋射精在线| 性小说AV| av男人的天堂网|